| 摘 要： | 目的:探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体-趋化因子受体4(CXCR4)活化对骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移能力的影响及其中的关键信号机制。方法:(1)采用Transwell小室法,分别于常氧(20%O_2)和低氧(5%O_2)条件下,检测CXCR4在BMSCs的表达情况;BMSCs的迁移能力;CXCR4阻断剂预处理对BMSCs迁移能力的影响。(2)将BMSCs分别置于常氧(20%O_2)和低氧(5%O_2)条件培养3d,检测两组BMSCs中CXCR4下游Jak2、PI3K和(或)Erk1/2三条信号通路标志分子的磷酸化水平,筛选SDF-1/CXCR4轴活化的关键信号通路。结果:(1)与常氧细胞培养组相比,低氧条件下CXCR4表达水平极高,已不再需要过表达CXCR4(慢病毒包装);低氧条件下培养的BMSCs的迁移能力明显提高,且与SDF-1的剂量成正比关系。(2)在有或无SDF-1刺激的条件下,特异性阻断SDF-1/CXCR4,低氧组BMSCs的迁移能力与对照组相比均差异无统计学意义。(3)与常氧细胞培养组相比,低氧组BMSCs的PI3K和Erk1/2磷酸化水平显著上升,而Jak2磷酸化水平有所下降。(4)与无SDF-1组相比,单独应用PI3K或Erk1/2抑制剂组SDF-1刺激BMSCs的迁移作用较强(P0.05);与无SDF-1组相比,PI3K和Erk1/2抑制剂联合应用组SDF-1刺激BMSCs的迁移作用差异无统计学意义。(5)特异性阻断SDF-1/CXCR4,PI3K和Erk1/2磷酸化水平均显著降低。结论:SDF-1/CXCR4主要通过PI3K和Erk通路促进BMSCs迁移。
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