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多穗柯无色花青素还原酶基因的克隆及其表达与根皮苷含量的相关性分析
引用本文:朱金丽,王卓,王志焱,张妍彤,黄剑,邢朝斌.多穗柯无色花青素还原酶基因的克隆及其表达与根皮苷含量的相关性分析[J].中草药,2020,51(12):3292-3297.
作者姓名:朱金丽  王卓  王志焱  张妍彤  黄剑  邢朝斌
作者单位:华北理工大学生命科学学院, 河北 唐山 063210;华北理工大学药学院, 河北 唐山 063210;百色学院农业与食品工程学院, 广西 百色 533000
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31760221);华北理工大学培育基金资助项目(SP201508)
摘    要:目的克隆多穗柯Lithocarpus polystachyus的无色花青素还原酶(leucoanthocyanidin reductase,LAR)基因,并对其表达量与根皮苷含量的关系进行分析。方法根据多穗柯转录组测序的结果(Unigene号:DN30711_c0_g1_i1),利用PCR法扩增获得多穗柯LAR基因的全长cDNA序列,进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测LAR基因的表达量,使用UPLC法测定根皮苷的含量,应用SPSS18.0软件分析LAR基因表达量与根皮苷含量间的相关关系。结果多穗柯LAR基因的cDNA全长1 053 bp,包含一个完整的开放阅读框,编码350个氨基酸。该蛋白不存在跨膜区域,定位于细胞质中。多穗柯LAR蛋白属于PCBER_SDR_a家族,与栓皮栎LAR蛋白具有较高的相似性(95%),且亲缘关系最近。多穗柯的根皮苷含量与LAR基因的表达量呈正相关(P0.05)关系。结论首次克隆得到多穗柯LAR基因,并证实多穗柯根皮苷含量与LAR基因的表达量呈正相关,为揭示多穗柯中根皮苷的生物合成机制奠定理论和技术基础。

关 键 词:多穗柯  无色花青素还原酶  克隆  根皮苷  表达
收稿时间:2019/11/3 0:00:00

Cloning and expression of LAR gene and its correlation with phloridzin content in Lithocarpus polystachyus
ZHU Jin-li,WANG Zhuo,WANG Zhi-yan,ZHANG Yan-tong,HUANG Jian,XING Zhao-bin.Cloning and expression of LAR gene and its correlation with phloridzin content in Lithocarpus polystachyus[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2020,51(12):3292-3297.
Authors:ZHU Jin-li  WANG Zhuo  WANG Zhi-yan  ZHANG Yan-tong  HUANG Jian  XING Zhao-bin
Institution:College of Life Sciences, North China University of Science and Technology, Tangshan 063210, China;School of Pharmacy, North China University of Science and Technology, Tangshan 063210, China;College of Agricultural and Food Engineering, Baise University, Baise 533000, China
Abstract:
Keywords:Lithocarpus polystachyus Rehd  leucoanthocyantin reductase  clone  phloridzin  expression
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