基于NLRP3炎性体轴和NF-κB信号通路探讨加味三妙丸防治痛风性关节炎的作用及机制

目的]基于Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor pyrin domain 3，NLRP3)炎性体轴和核因子-κB(nuclear factor-κB，NF-κB)信号通路，探讨加味三妙丸(modified Sanmiao pill，MSMP)对THP-1细胞痛风炎症模型的抗炎作用及机制。方法]通过尿酸钠(monosodium urate，MSU)和脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)共同诱导建立THP-1细胞痛风炎症模型。以MTT法测定细胞存活率；酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)测定细胞培养基中白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)分泌水平，Western blot检测NLRP3炎性体轴和NF-κB信号通路中相关蛋白表达情况。结果]MSU与LPS联用可诱导THP-1细胞产生典型痛风炎症。与空白组比较，模型组THP-1细胞分泌IL-1β水平显著升高(P＜0.01)；NLRP3炎性体轴相关蛋白NLRP3、含CARD结构域的凋亡相关颗粒样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD，ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1，caspase-1)、磷酸化NF-κB p65(phospho-NF-κB p65，p-NF-κB p65)、磷酸化NF-κB抑制蛋白α(phospho-inhibitor of NF-κB α，p-IκBα)、磷酸化IκB激酶α(phospho-inhibitor of NF-κB kinase α，p-IKKα)及上游调节蛋白髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88，MyD88)、Toll样受体2(Toll-like receptor 2，TLR2)、Toll样受体4(Toll-like receptor 4，TLR4)表达明显上调(P＜0.01)。与模型组比较，MSMP具有较强的抗炎效果，对NLRP3炎性体轴和NF-κB信号通路两条路径相关蛋白的异常表达均具有明显的调控作用，不同剂量的MSMP显著降低IL-1β的分泌(P＜0.01)，明显下调NLRP3、ASC、caspase-1、p-NF-κB、p-IκBα、p-IKKα及MyD88、TLR2、TLR4等蛋白的表达，且具有剂量依赖性(P＜0.05，P＜0.01)。结论] MSMP在痛风炎症细胞模型上表现出较强的抗痛风性关节炎作用，其机制与调控NLRP3炎性体轴和NF-κB信号通路相关蛋白的表达密切相关。