| shRNA干扰VEGF表达对白血病细胞多药耐药的影响 |
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| 引用本文： | 方莉莉,许文林,陈琛,房新建,陈巧云,李娟. shRNA干扰VEGF表达对白血病细胞多药耐药的影响[J]. 江苏大学学报(医学版), 2009, 19(3) |
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| 作者姓名： | 方莉莉 许文林 陈琛 房新建 陈巧云 李娟 |
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| 作者单位： | 江苏大学附属人民医院中心实验室,江苏,镇江,212002 |
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| 摘 要： | 目的:探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)与人白血病耐药细胞株K562/A02细胞多药耐药的关系及其机制.方法:针对VEGF基因设计合成3条干扰片段shRNA1,2,3,采用脂质体2000分别将其转染入K562/A02细胞,RT-PCR法检测VEGF和多药耐药相关基因MDR1,MRP1,topoⅡ,GST的mRNA水平;蛋白质印迹法检测VEGF蛋白水平;MTT法检测各组细胞对多柔比星的半数抑制浓度(IC50值).结果:K562/A02细胞VEGF mRNA表达水平显著高于敏感株K562细胞,差异有统计学意义(P<0.01),且VEGF蛋白水平也显著高于K562细胞;转染shRNA后,K562/A02细胞中VEGF mRNA水平出现不同程度下调,其中shRNA2组和shRNA3组与转染随机片段组比较差异有统计学意义(P<0.05),以shRNA3组下调最显著,并且VEGF蛋白水平也出现相应的下调;转染48 h后K562/A02细胞中MDR1,MRP1及topoⅡ的mRNA水平均出现不同程度下调,以shRNA3组下调最显著,分别下调(39.7±1.21)%,(29.1±0.97)%,(28.2±1.04)%,GST基因表达则无明显变化;阳性转染组细胞对多柔比星的敏感性明显增加,其中以shRNA3组最显著.结论:VEGF shRNA可以抑制K562/A02细胞VEGF基因与蛋白的表达,不同干扰片段的沉默效果不同,并增强K562/A02细胞对多柔比星的敏感性,其机制可能与MDR1,MRP1及topo Ⅱ的表达下调有一定的关系.
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| 关 键 词： | 血管内皮生长因子 RNA干扰 K562/A02细胞 多药耐药 |
Effect of knockdown of VEGF expression by shRNA on multidrug resistance of leukemia cell line K562/A02 |
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| FANG Li-li,XU Wenlin,CHEN Chen,FANG Xin-jian,CHEN Qiao-yun,LI Juan. Effect of knockdown of VEGF expression by shRNA on multidrug resistance of leukemia cell line K562/A02[J]. Journal of Jiangsu University Medicine Edition, 2009, 19(3) |
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| Authors: | FANG Li-li XU Wenlin CHEN Chen FANG Xin-jian CHEN Qiao-yun LI Juan |
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