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pcDNA3.1+-HIF-1α载体的构建和初步表达鉴定
引用本文:傅锐斌,吴平生,戴铁英,赖文岩,邱建. pcDNA3.1+-HIF-1α载体的构建和初步表达鉴定[J]. 南方医科大学学报, 2003, 23(11): 1134-1136
作者姓名:傅锐斌  吴平生  戴铁英  赖文岩  邱建
作者单位:1. 第一军医大学南方医院心内科,广东,广州,510515
2. 广州军区广州总医院心内科,广东,广州,510010
基金项目:国家自然科学基金(39870812),广东省自然科学基金(980235)~~
摘    要:目的克隆和构建带人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因真核表达载体pcDNA3.1 -HIF-1α。方法以大肠癌细胞株HT29的总RNA为模板,进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),获得HIF-1α的cDNA,克隆入T载体,测序证实后克隆入真核表达载体pcDNA3.1 ,酶切鉴定重组子。将构建好的pcDNA3.1 -HIF-1α用脂质体法转入HEK293细胞,RT-PCR鉴定重组质粒的表达。结果扩增出HIF-1αcDNA全长,测序结果与Genbank记载完全一致,成功克隆入真核表达载体pcDNA3.1 ;建立了稳定的细胞株HEK293/pcDNA3.1 -HIF-1α。结论成功克隆和构建带人HIF-1α基因真核表达载体pcDNA3.1 -HIF-1α,并证明其能在真核细胞内表达。

关 键 词:低氧诱导因子  逆转录-聚合酶链反应  克隆  分子  真核表达载体  质粒  转染
文章编号:1000-2588(2003)11-1134-03
修稿时间:2003-04-23

Construction and expression analysis of recombinant vector pcDNA3.1+-HIF-1α
FU Rui-bin,WU Ping-sheng,DAI Tie-ying,LAI Wen-yan,QIU Jian. Construction and expression analysis of recombinant vector pcDNA3.1+-HIF-1α[J]. Journal of Southern Medical University, 2003, 23(11): 1134-1136
Authors:FU Rui-bin  WU Ping-sheng  DAI Tie-ying  LAI Wen-yan  QIU Jian
Affiliation:FU Rui-bin1,WU Ping-sheng1,DAI Tie-ying1,LAI Wen-yan1,QIU Jian21Department of Cardiology,Nanfang Hospital,First Military Medical University,Guangzhou 510515,China, 2Department of Cardiology,Guangzhou General Hospital of Guangzhou Command,Guangzhou 510010,China
Abstract:
Keywords:
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