| 双启动子shRNA真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 娜仁,郭刚,张瑞,赵郁,汪蓓蕾,梁东春,杨宇虹.双启动子shRNA真核表达载体的构建[J].天津医药,2010,38(10):840. |
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| 作者姓名： | 娜仁 郭刚 张瑞 赵郁 汪蓓蕾 梁东春 杨宇虹 |
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| 作者单位： | 1. 卫生部激素与发育重点实验室,天津医科大学代谢病医院内分泌研究所,300070
2. 天津医科大学生化教研室 |
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| 基金项目： | 天津市高等学校科技发展基金计划项目，天津市科技攻关计划重大科技项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建含有双启动子的shRNA真核表达载体.方法:通过PCR分别扩增带有BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/E)和带有Bgl Ⅱ、HindⅢ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/H),用BamH Ⅰ与EcoRⅠ双酶切pcDNA3.1(+)与PCR产物U6-B/E后进行连接,重组质粒命名为psPRO.再用BglⅡ与HindⅢ双酶切psPRO与PCR产物U6-B/H后进行连接,构建含有双启动子的shRNA真核表达载体.结果:酶切鉴定以及DNA测序结果显示载体构建成功.结论:构建双启动子的shRNA真核表达载体,使其在细胞中表达2个不同的siRNA,不仅筛选方便,而且可以通过建立这种模式化工具载体,为今后RNA干扰实验研究的开展和深入提供手段.
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| 关 键 词： | 启动区(遗传学) 遗传载体 RNA 小分子干扰 聚合酶链反应 重组 遗传 质粒 |
Construction of a shRNA Eukaryotic Expression Vector of Dual Promoters |
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| NA Ren,GUO Gang,ZHANG Rui,ZHAO Yu,WANG Beilei,LIANG Dongchun,YANG Yuhong.Construction of a shRNA Eukaryotic Expression Vector of Dual Promoters[J].Tianjin Medical Journal,2010,38(10):840. |
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| Authors: | NA Ren GUO Gang ZHANG Rui ZHAO Yu WANG Beilei LIANG Dongchun YANG Yuhong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | dual promoters shRNA vector construction |
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