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TGF-β1mRRA荧光实时定量PCR检测初筛方法的建立及初步运用
引用本文:胡璟谊,李君,季敬璋,吕建新. TGF-β1mRRA荧光实时定量PCR检测初筛方法的建立及初步运用[J]. 温州医学院学报, 2006, 36(4)
作者姓名:胡璟谊  李君  季敬璋  吕建新
摘    要:
目的:建立荧光实时定量检测人转化生长因子异构体(TGF-β1)mRNA的方法.方法:抽取外周静脉血,予EDTA抗凝,用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,用Trizol裂解液提取总RNA,将总RNA逆转录为cDNA,在扩增体系中加入SYBR Green Ⅰ,应用FQ-RT-PCR定量检测TGF-β1mRNA.结果:该法检测TGF-β1mRNA的灵敏度达105拷贝/ml,线性范围为105~1011拷贝/ml,Ct值的批内、批间变异系数分别为2.27%~2.56%和4.78%~5.22%.临床应用显示,糖尿病患者PBMC中TGF-β1mRNA的含量显著高于正常对照组(P<0.05).结论:FQ-RT-PCR应用于检测TGF-β1mRNA的初筛方法具有简便、快速等特点,为临床应用提供了方法学依据.

关 键 词:逆转录-聚合酶链反应  转化生长因子-β1  糖尿病

Establishment and preliminary application of the screening model for transforming growth factor β1 mRNA by fluorescence quantitative reverse transcription polymerase chain reaction
Abstract:
Keywords:
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