兔戊型肝炎病毒ORF2编码蛋白的抗原表位分析 |
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引用本文: | 王松,戴星,董晨,董敏,梁久红,孟继鸿.兔戊型肝炎病毒ORF2编码蛋白的抗原表位分析[J].东南大学学报(医学版),2013,32(3):261-266. |
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作者姓名: | 王松 戴星 董晨 董敏 梁久红 孟继鸿 |
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作者单位: | 王松 (东南大学,医学院,江苏,南京,210009); 戴星 (东南大学附属中大医院皮肤科,江苏,南京,210009); 董晨 (东南大学,医学院,江苏,南京,210009); 董敏 (东南大学,医学院,江苏,南京,210009); 梁久红 (东南大学,医学院,江苏,南京,210009); 孟继鸿 (东南大学,医学院,江苏,南京,210009); |
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基金项目: | 国家高技术发展计划(863计划)项目(2006AA02A235);国家自然科学基金资助项目(30671858);江苏省科技支撑计划项目(BE2009664) |
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摘 要: | 目的:研究新发现的兔戊型肝炎病毒(HEV)与所有已知基因型HEV抗原表位的异同,为阐明动物HEV的人畜共患特征及戊型肝炎的诊断提供依据。方法:制备兔HEV ORF2重组蛋白R166(aa452-617),并免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体(McAb);采用间接ELISA法及免疫印迹法,检测McAbs与已知基因型HEV ORF2重组蛋白p166Bur(1型)、p166Mex(2型)、p166US(3型)和p166Chn(4型)的交叉反应性。用获得的杂交瘤细胞制备腹水,利用基于PCR的HEV体外中和试验,检测它们对基因1、4型人HEV和兔HEV的中和活性。结果:获得3株稳定分泌抗-R166的McAbs的杂交瘤细胞株,即1C1、6F9和10D2。其中1C1和6F9分泌的McAbs与已知1、2、3、4基因型p166均结合;10D2分泌的McAb只与R166特异结合,而不与1、2、3、4基因型p166结合。3株McAbs腹水均不能中和基因1、4型人HEV和兔HEV,提示3株McAbs针对非中和性抗原表位。结论:兔HEV与已知1、2、3、4基因型HEV既含有共同的抗原表位,也含有不同的抗原表位,具有不同的抗原特征。
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关 键 词: | 兔戊型肝炎病毒 重组ORF2蛋白 抗原表位 单克隆抗体 |
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