人白血病细胞 HL-60凋亡启动时相的亚细胞蛋白质组学研究

目的：建立全反式维甲酸（ ATRA）诱导HL-60细胞凋亡启动模型，分析凋亡启动时细胞总蛋白和亚细胞组分蛋白的表达情况。方法：体外培养HL-60细胞，氮唑蓝（ MTT）比色法检HL-60细胞测增殖活性，流式细胞术（ FCM）检HL-60细胞测细胞凋亡和细胞周期分布；高速离心法分离对照组与凋亡启动时相的HL-60细胞核、膜和细胞器以及细胞质等组分蛋白；双向电泳（2-DE）HL-60细胞总蛋白和亚细胞组分蛋白，图像分析软件分析2-DE图谱，筛选差异表达蛋白，并进行液相色谱串联质谱（ LC- MS/MS）鉴定。结果：ATRA明显抑制HL-60细胞增殖，并随浓度、时间的增加，抑制作用也越显著；以1μmol/L的ATRA诱导HL-60细胞48 h早期凋亡比例为13.21％，细胞形态也存在明显变化；筛选出22个差异表达蛋白点，其中5个蛋白在凋亡启动时表达上调，15个蛋白表达下调，2个蛋白只在凋亡启动时表达；它们的功能主要涉及与细胞凋亡相关的蛋白，与细胞分化、增殖相关的蛋白和其它蛋白。结论：1μmol/L的ATRA诱导HL-60细胞生长48 h，成功建立细胞凋亡启动模型；凋亡启动时相的HL-60细胞质、膜和细胞器以及细胞总蛋白的表达都存在差异，这些差异表达蛋白可能在细胞凋亡启动时起重要作用。

Subcellular Proteomic Analysis of the Startup Phase of Apoptosis of the HL-60 Cells Induced by All-trans Retinoic Acid