| 腺相关病毒载体对心肌细胞感染和外源基因表达的作用 |
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| 引用本文： | 鲁晓春,李小鹰,马鑫,袁振华,吴小兵. 腺相关病毒载体对心肌细胞感染和外源基因表达的作用[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2003, 7(30): 4056-4057 |
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| 作者姓名： | 鲁晓春 李小鹰 马鑫 袁振华 吴小兵 |
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| 作者单位： | 1. 解放军总医院老年心内科,北京市,100853
2. 中国疾病预防控制中心病毒基因工程实验室,北京市,100052 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973)资助项目(G2000056906)~~ |
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| 摘 要： | 目的:为进一步研究肌质网钙ATP酶转基因在心力衰竭中的质粒价值,并观察腺相关病毒对心肌细胞感染的动态过程和对外源基因的表达能力。方法:构建含肌质网钙ATP酶的腺相关病毒载体(recombinantade-no-associatedvirus-sarcoplasmicreticulumcalciumATPase2a,rAAV-SERCA2a),利用激光共聚焦显微镜观察了活体异硫氰酸荧光素标记的腺相关病毒(fluoresceinisothiocyanate-rAAV,FITC-rAAV)进入心肌细胞的过程,利用流式细胞仪检测含绿色荧光蛋白的腺相关病毒rAAV-GFP感染心肌细胞后绿色荧光蛋白表达细胞的百分率。结果:构建、生产的重组病毒rAAV-SERCA2a的滴度为7×1014v·g/L,并可以有效介导肌质网钙ATP酶基因转录;FITC-rAAV感染心肌细胞后,大约15min可见病毒吸附在细胞膜上,30min时可大部分进入细胞内;未加丁酸钠组腺相关病毒介导的绿色荧光蛋白表达效率最高达33.3%,加用丁酸钠组该数据为48.7%。结论:成功构建了含肌质网钙ATP酶的腺相关病毒载体,该病毒可有效介导目的基因的表达。在体外腺相关病毒能有效感染心肌细胞,感染后的心肌细胞能有效表达外源基因。
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| 关 键 词： | 腺病毒科 基因疗法 心力衰竭 充血性 |
| 文章编号： | 1671-5926(2003)30-4056-02 |
| 修稿时间： | 2003-07-22 |
Effect of adeno-associated virus carrier on infection of cardiac myocytes and expression of exogenous genes |
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| Xiao Chun Lu,Xiao Ying Li. Effect of adeno-associated virus carrier on infection of cardiac myocytes and expression of exogenous genes[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2003, 7(30): 4056-4057 |
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| Authors: | Xiao Chun Lu Xiao Ying Li |
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| Affiliation: | Xiao Chun Lu,Xiao Ying Li,Department of Geriatric Cardiology,Chinese PLA General Hospital,Beijing 100853,China Xin Ma,Zhen Hua Yuan,Xiao Bing Wu,Institute of Virogene,Chinese Academy of Preventive Medicine,Beijing 100052,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | The constructed rAAV SERCA2a can effectively mediate the SERCA2a gene.rAAV can infect cardiac myocytes in vitro and the infected cell can express exogenous gene effectively. |
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