| ICAP1α基因及其突变体T38A、I138A真核表达载体的构建和鉴定 |
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| 引用本文： | 程忠良,秦瑾,刘正湘,林敬阳,刘毓,左后娟,汪道文.ICAP1α基因及其突变体T38A、I138A真核表达载体的构建和鉴定[J].医学研究生学报,2009,22(12):1243-1247,I0009. |
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| 作者姓名： | 程忠良 秦瑾 刘正湘 林敬阳 刘毓 左后娟 汪道文 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科,湖北武汉,430030 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:整合素β1-ICAP1α复合体在细胞黏附等过程中介导双向跨膜信号转导,并与囊泡特异性标记物共定位.文中构建并鉴定ICAP1α基因及其突变体T38A、I138A真核表达载体. 方法:以pCMV-SPORT6/ICAP1α质粒为模板,PCR扩增ICAP1α基因片段,双酶切后与AAV载体重组连接.同时采用重叠PCR定点突变法构建其突变体pAAV-T38A、pAAV-I138A表达载体.重组质粒经酶切鉴定和DNA 序列测定, 筛选出重组pAAV-ICAP1α、pAAV-T38A和pAAV-I138A真核表达载体. 结果:阳性重组质粒酶切后测序比对鉴定,与预期序列完全相符.结论:成功构建pAAV-ICAP1α、pAAV-T38A和pAAV-I138A真核表达载体,可为ICAP1α基因及其突变体T38A、I138A的生物学功能研究提供基因材料.
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| 关 键 词： | ICAP1α 整合素β1 |
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