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小RNA干扰细胞周期蛋白Y基因表达对喉癌Hep-2细胞增殖的影响
引用本文:邰隽,李爱东,饶远生,黄育北,黄志刚,于振坤,陈晓红,周维国,肖潇.小RNA干扰细胞周期蛋白Y基因表达对喉癌Hep-2细胞增殖的影响[J].中华耳鼻咽喉头颈外科杂志,2013,48(9).
作者姓名:邰隽  李爱东  饶远生  黄育北  黄志刚  于振坤  陈晓红  周维国  肖潇
作者单位:1. 儿童耳鼻咽喉头颈科学北京市重点实验室, 首都医科大学附属北京儿童医院北京市儿科研究所,100045
2. 首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科
3. 首都医科大学附属北京安贞医院耳鼻咽喉头颈外科
4. 天津医科大学肿瘤医院肿瘤研究所流行病室
基金项目:国家自然科学基金面上项目
摘    要:目的 利用RNA干扰技术下调细胞周期蛋白Y(Cyclin Y,CCNY)基因的表达,观察其对喉癌Hep-2细胞增殖的影响.方法 构建针对CCNY基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,包装慢病毒感染喉癌Hep-2细胞.将细胞分为2组,对照组和实验组(感染CCNY shRNA慢病毒组).运用Real-time PCR检测CCNY在RNA水平的变化;四甲基偶氮唑蓝法和平板克隆形成实验检测CCNY表达下调对细胞增殖的影响.结果 成功包装表达CCNYshRNA的慢病毒并感染Hep-2细胞,shRNA下调CCNY的表达后,与对照组相比CCNY在mRNA水平的表达显著下降,抑制率为75.3% (P <0.05).表达CCNY shRNA的慢病毒感染5d后,继续培养6d,细胞的生长明显受到抑制(P <0.001).细胞在体外培养10 d后形成克隆的潜力降低了60%.结论 靶向CCNY基因RNA干扰能够阻抑喉癌Hep-2细胞的CCNY表达,抑制细胞增殖,CCNY基因有望成为喉癌基因治疗靶点.

关 键 词:细胞周期蛋白类  喉肿瘤  细胞系  肿瘤  RNA  小分子干扰  细胞增殖

Influence on cell proliferation by small interfering RNA of Cyclin Y expression in laryngeal cancer cells
Abstract:
Keywords:Cyclins  Laryngeal neoplasms  Cell line  tumor  RNA  small interfering  Cell proliferation
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