| SYBR Green Ⅰ Real-time PCR检测IFN-CSP对HepG2.2.15细胞内HBV-DNA影响 |
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| 作者姓名： | 陈朝霞 刘阿龙 唐亚男 汪洁 朱家勇 卢雪梅 |
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| 作者单位： | 广东药科大学基础学院/广东省生物活性药物研究重点实验室,广东 广州,510006 |
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| 基金项目： | 国家科技部新药创制重大专项项目，国家自然科学基金资助项目，广东省基础与应用基础研究专项，广东省公益研究与能力建设项目，广州市科学(技术)研究专项项目，广东药学院科技处-附属第一医院联合自然科学培育基金项目 |
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| 摘 要： | 目的 建立SYBR Green Ⅰ Real-time PCR检测HBV-DNA方法,并检测IFN-CSP对HepG2.2.15细胞内HBV-DNA影响.方法 提取HepG2.2.15细胞DNA,PCR扩增后纯化,PCR纯化产物梯度稀释作为标准品,采用SYBR Green Ⅰ Real-time PCR 检测,建立标准曲线,并分析方法的特异性、灵敏度、重复性和稳定性.运用建立的SYBR Green Ⅰ 方法检测IFN-CSP对HepG2.2.15细胞内HBV-DNA影响,并与Taqman方法进行比较.结果 SYBR Green Ⅰ Real-time PCR方法特异性、重复性及稳定性均较好,线性范围为107~102copies,检测灵敏度可达102copies.IFN-CSP对HepG2.2.15细胞内HBV-DNA具有抑制效果,且呈剂量依赖性.SYBR Green Ⅰ 方法与Taqman商业试剂盒检测结果差异无统计学意义.结论 SYBR Green Ⅰ Real-time PCR方法简便快速、结果准确、价格低廉,可以满足HBV-DNA拷贝数检测的需要.
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| 关 键 词： | SYBRGreenⅠ Real-timePCR HBV-DNA IFN-CSP |
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