| 截短形式弓形虫SAG1抗原在大肠杆菌中的可溶性高效表达、纯化及免疫反应性鉴定 |
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| 引用本文： | 言慧,李华,周晓红,吴昆,陈晓光. 截短形式弓形虫SAG1抗原在大肠杆菌中的可溶性高效表达、纯化及免疫反应性鉴定[J]. 南方医科大学学报, 2004, 24(4): 412-414 |
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| 作者姓名： | 言慧 李华 周晓红 吴昆 陈晓光 |
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| 作者单位： | 第一军医大学寄生虫教研室,广东,广州,510515;第一军医大学寄生虫教研室,广东,广州,510515;第一军医大学寄生虫教研室,广东,广州,510515;第一军医大学寄生虫教研室,广东,广州,510515;第一军医大学寄生虫教研室,广东,广州,510515 |
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| 基金项目： | 广东省重大科技攻关项目(A1090205)，广州市科技计划项目(2002Z-T24011)~~ |
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| 摘 要： | 目的在大肠杆菌中以可溶性形式高效表达弓形虫SAG1基因的截短片段,并进行纯化及免疫反应性鉴定。方法利用NcoⅠ、HindⅢ双酶切,从本室建立的pET-30a( )-SAG1重组质粒中获取SAG1基因的截短片段,并将目的片段连接到经同样双酶切的质粒pET32a中,构建表达重组质粒pET-32a( )-trSAG1。将重组质粒转入E.coliBL21中并进行诱导表达。表达蛋白经Ni-NTA agarose纯化后, Western-blotting分析其免疫反应性。结果成功构建重组质粒pET-32a( )-trSAG1 ,通过IPTG诱导得到了以可溶性形式表达的重组SAG1蛋白,相对分子质量40 000,Western-blotting结果显示纯化的重组蛋白具有良好的免疫反应性,ELISA试验表明重组SAG1蛋白能被弓形虫免疫兔血清及弓形虫感染人血清识别。结论在大肠杆菌中以可溶性形式高效表达了弓形虫SAG1基因的截短片段,表达蛋白能被弓形虫免疫兔血清及弓形虫感染人血清识别,有望成为一种有价值的诊断抗原。
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| 关 键 词： | 弓形虫 SAG1 纯化 免疫印迹 ELISA |
| 文章编号： | 1000-2588(2004)04-0412-03 |
| 修稿时间： | 2003-12-19 |
Efficient soluble expression, purification and identification of the truncated SAG1 gene of Toxoplasma gondii in Escherichia coli |
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| YAN Hui,LI Hua,ZHOU Xiao-hong,WU Kun,CHEN Xiao-guang Departmemt of Parasitology,First Military Medical University,Guangzhou ,China. Efficient soluble expression, purification and identification of the truncated SAG1 gene of Toxoplasma gondii in Escherichia coli[J]. Journal of Southern Medical University, 2004, 24(4): 412-414 |
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| Authors: | YAN Hui LI Hua ZHOU Xiao-hong WU Kun CHEN Xiao-guang Departmemt of Parasitology First Military Medical University Guangzhou China |
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| Affiliation: | YAN Hui,LI Hua,ZHOU Xiao-hong,WU Kun,CHEN Xiao-guang Departmemt of Parasitology,First Military Medical University,Guangzhou 510515,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Toxoplasma gondii SAG1 purification Western-blotting enzyme-linked immunosorbent assay |
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