肝癌细胞冻融抗原负载树突状细胞瘤苗的制备与活化 |
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引用本文: | 高维实,闵军,褚忠华,陈涛,魏菁,区庆嘉.肝癌细胞冻融抗原负载树突状细胞瘤苗的制备与活化[J].中国病理生理杂志,2003,19(9):1279-1282. |
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作者姓名: | 高维实 闵军 褚忠华 陈涛 魏菁 区庆嘉 |
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作者单位: | 1. 中山大学附属第二医院肝胆外科, 广东 广州 510120;
2. 中山大学附属第二医院干细胞研究中心, 广东 广州 510120;
3. 中山大学附属第二医院医学研究中心, 广东 广州 510120 |
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基金项目: | 中山大学附属第二医院重点项目基金资助( 2 0 0 2 -Z0 6 ) |
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摘 要: | 目的: 探讨制备肝癌树突状细胞(DCs)瘤苗和体外诱导DCs活化的优化方法。方法: 取健康人新鲜血50mL, Ficoll密度梯度离心分离外周血单个核细胞(PBMC), 制备肝癌细胞冻融抗原, 采用不同因子组合培养PBMC, 诱导和激活DCs, A组: rhGM-CSF+IL-4; B组: rhGM-CSF+IL-4+冻融抗原负载;C组:rhGM-CSF+IL-4+TNF-α; D组: rhGM-CSF+IL-4+TNF-α+冻融抗原负载。结果: 各组均诱导出DCs, 并高表达CD11c和CD54, 冻融抗原可明显上调CD86、CD80、HLA-DR表达和IL-12 p40分泌(P<0.01), TNF-α促进CD86表达的作用更显著, 但对IL-12分泌无影响, 依次用TNF-α诱导和冻融抗原负载可进一步促进CD86表达和IL12 p40分泌(P<0.05)。CD54和HLA-DR双标记免疫细胞化学染色显示, 各组DCs大多为CD54+。表达HLA-DR的DCs均为CD54+HLA-DR+, 其中, A组CD54+HLA-DR+细胞数量最少, D组最多, 平均每个细胞HLA-DR的表达水平也与此对应。结论: 采用rhGM-CSF、IL-4诱导的未成熟DCs, 依次使用TNF-α刺激与肝癌细胞冻融抗原修饰可有效促进DCs的活化与成熟。
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关 键 词: | 树突状细胞 肝癌 肿瘤抗原 疫苗 |
文章编号: | 1000-4718(2003)09-1279-04 |
收稿时间: | 2003-04-15 |
Producing and activating of hepatocellular carcinoma cells lysate-pulsed dendrites cells vaccine in vitro |
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Keywords: | |
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