| 重组SRH融合蛋白工程菌发酵的工艺研究 |
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| 引用本文： | 徐涛,邹民吉,王旻,付文亮,王圆圆,刘深,徐东刚.重组SRH融合蛋白工程菌发酵的工艺研究[J].医学研究杂志,2012,41(11):18-21. |
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| 作者姓名： | 徐涛 邹民吉 王旻 付文亮 王圆圆 刘深 徐东刚 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院基础医学研究所, 北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家科技重大专项"重大新药创制"基金资助项目，国家自然科学基金青年基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的通过对影响表达SRH融合蛋白工程菌发酵的主要因素的研究,建立适宜SRH融合蛋白工程菌的发酵工艺。方法通过对发酵过程中的pH、溶氧调控、诱导温度、诱导时机及诱导时间进行优化建立SRH蛋白的发酵工艺,利用SDS-PAGE电泳分析表达情况。进一步利用离子交换和凝胶过滤层析对目的蛋白进行纯化,并对纯化后目的蛋白的溶栓活性和抗凝活性进行检测。结果优化后发酵条件为:发酵pH为7.0、溶氧为45%、菌体浓度达到OD600=8时开始诱导,诱导温度为41℃,诱导时间为4.5h。该发酵条件下得菌量为25g/L。SRH蛋白表达量为45%,并且90%以上为可溶性表达,纯化后蛋白纯度达95%以上,纯品SRH蛋白溶栓活性为1.80×104AU/mg,抗凝活性为100AU/mg。结论建立了SRH融合蛋白工程菌稳定的发酵工艺,该条件下SRH工程菌发酵蛋白表达量较高,多为可溶性表达,且杂蛋白较少,发酵产物具有生物学活性。
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| 关 键 词： | SRH融合蛋白 工程菌发酵 条件优化 |
Study on The Fermentation Technology of Engineering Bacteria Expressing Recombinant Fusion Protein SRH |
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| Xu Tao
,
Zou Minji
,
Wang Min
,
Fu Wenliang
,
Wang Yuanyuan
,
Liu Shen
,
Xu Donggang.Study on The Fermentation Technology of Engineering Bacteria Expressing Recombinant Fusion Protein SRH[J].Journal of Medical Research,2012,41(11):18-21. |
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| Authors: | Xu Tao Zou Minji Wang Min Fu Wenliang Wang Yuanyuan Liu Shen Xu Donggang |
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| Institution: | .Institute of Medical Sciences,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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