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成纤维细胞生长因子受体3腺病毒载体的包装与鉴定
引用本文:刘志君,陈林. 成纤维细胞生长因子受体3腺病毒载体的包装与鉴定[J]. 第三军医大学学报, 2007, 29(7): 561-564
作者姓名:刘志君  陈林
作者单位:第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤中心实验室,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤中心实验室,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:目的 构建成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptors 3,FGFR3)腺病毒载体,并进行鉴定、包装及表达检测.方法 将小鼠FGFR3 cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,通过电击转化使其在BJ5183细菌中与AdEasy-1同源重组,通过酶切及测序筛选阳性重组子.以脂质体介导法转染HEK293细胞进行包装、扩增并测定其滴度;并用RT-PCR及Western blot检测FGFR3在HT29细胞中的表达.结果 经限制性内切酶检测、测序鉴定和细胞转染后GFP的表达等证实成功地构建了携带FGFR3 cDNA的重组腺病毒载体并制备出有感染能力的高滴度重组腺病毒.将构建的腺病毒重组子转染HT29细胞,RT-PCR及Western blot均检测到FGFR3的表达.结论 成功地构建了含有FGFR3cDNA的重组腺病毒载体并在HT29中表达了小鼠FGFR3分子,为进一步研究FGFR3的功能及其在骨折愈合中的作用提供有效的基因转移载体.

关 键 词:FGFR3  腺病毒  转染
文章编号:1000-5404(2007)07-0561-04
修稿时间:2006-05-26

Construction and identification of recombinant adenovirus encoding mouse FGFR3 cDNA
LIU Zhi-jun,CHEN Lin. Construction and identification of recombinant adenovirus encoding mouse FGFR3 cDNA[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2007, 29(7): 561-564
Authors:LIU Zhi-jun  CHEN Lin
Affiliation:State Key Laboratory of Trauma, Burns and Combined Injury, Trauma Center, Daping Hospital, Third Mill tarv Medical University, Chongqing 400042, China
Abstract:
Keywords:FGFR3
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