| 淡色库蚊细胞色素P450 CYP4E2r6基因的克隆、表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 李秀兰,膝达,孙艳,马磊,朱昌亮. 淡色库蚊细胞色素P450 CYP4E2r6基因的克隆、表达及鉴定[J]. 中国人兽共患病杂志, 2005, 21(7): 552-557 |
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| 作者姓名： | 李秀兰 膝达 孙艳 马磊 朱昌亮 |
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| 作者单位： | [1]南京医科大学病原生物学系,南京210029 [3]南京医科大学病原生物学系,南京210029／／南京师范大学生命科学学院江苏省资源生物技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 江苏省教育厅资助项目(01KJB310006)，南京师范大学生命科学学院江苏省资源生物技术重点实验室开放研究课题资助项目 |
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| 摘 要： | 目的克隆并表达鉴定淡色库蚊细胞色素P450(CYP4E2r6)基因。方法根据昆虫细胞色素P450氨基酸保守序列设计一对简并引物，采用RT—PCR，从淡色库蚊四龄幼虫mRNA中扩增出目的基因片段。产物经T—A克隆、测序、比对，在抗性品系高表达的CYP4E2r6亚克隆入原核表达载体pGEX-6P1，在大肠杆菌BL21中进行原核表达。将细菌总蛋白进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果14个阳性克隆中9个为CYP4新序列，由GenBank登录上网(GenBank／NCBI CB074944—51、CB270837，2003年)；经鉴定属CYP4家族CYP4H、CYP4E、CYP4J亚家族；CYP4E2r6基因已成功表达。结论获得的CYP4E2r6融合表达蛋白为进一步研究CYP4基因与抗药性之间的关系奠定基础。
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| 关 键 词： | 淡色库蚊 细胞色素P450 CYP4E2r6 原核表达 |
| 文章编号： | 1002-2694(2005)07-0552-06 |
| 修稿时间： | 2004-12-17 |
Cloning, expression and identification of the cytochrome P450 gene CYP4E2r6 from Culex pipiens pallens |
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| LI Xiu-lan,TENG Da,SUN Yan,Ma Lei,ZHU Chang-liang. Cloning, expression and identification of the cytochrome P450 gene CYP4E2r6 from Culex pipiens pallens[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2005, 21(7): 552-557 |
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| Authors: | LI Xiu-lan TENG Da SUN Yan Ma Lei ZHU Chang-liang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Culex pipiens pallens cytochrome P450 CYP4E2r6 heterologous expression. |
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