|
|||||
|
|
| 转化生长因子β_1刺激肝星状细胞差异表达下调基因筛选 | |
| 引用本文： | 肖琳,成军,郭江,张黎颖,洪源,伦永志,蓝贤勇,武会娟,张丽娟,张跃新,张建龙,李燕.转化生长因子β_1刺激肝星状细胞差异表达下调基因筛选[J].中华实验和临床感染病杂志（电子版）,2010,4(3):1-5. |
| 作者姓名： | 肖琳 成军 郭江 张黎颖 洪源 伦永志 蓝贤勇 武会娟 张丽娟 张跃新 张建龙 李燕 |
| 作者单位： | 1. 新疆医科大学第一附属医院感染科,乌鲁木齐市,830011 2. 首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所 3. 新疆医科大学基础医学院 4. 中国医学科学院/北京协和医学院药物研究所 |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划"973"项目，新疆科技厅自然基金 |
| 摘 要： | 目的筛选并克隆转化生长因子β1(TGF-β1)刺激肝星状细胞差异表达下调基因,阐明TGF-β1导致肝纤维化的分子生物学机制。方法以TGF-β1及磷酸盐缓冲液分别刺激大鼠肝星状细胞(即实验组和对照组),提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaⅠ酶切后,将对照组细胞cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与实验组细胞cDNA进行2次消减杂交及2次抑制性PCR扩增,将产物与pGEM-Teasy载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠埃希菌进行文库扩增,随机挑选克隆经PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果成功构建了TGF-β1刺激肝星状细胞差异表达基因的cDNA消减文库。文库扩增后得到98个阳性克隆,进行菌落PCR分析,均得到200～1000bp插入片段。选取含有插入片段的35个克隆进行测序,并通过生物信息学分析获得了19种已知基因序列和2个未知功能基因。结论应用抑制性消减杂交技术成功构建了TGF-β1刺激的肝星状细胞差异表达基因的cDNA消减文库,为进一步阐明TGF-β1参与肝纤维化的分子生物学机制提供了理论依据。 |
| 关 键 词： | 转化生长因子β1 抑制性消减杂交技术 肝星状细胞 肝纤维化 反式激活 |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |