重组人TGF-β1融合蛋白的克隆、表达、纯化及鉴定 |
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作者姓名: | 姜昌丽 张英起 颜真 |
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作者单位: | 第四军医大学药学系生物技术中心,陕西,西安,710033;第四军医大学药学系生物技术中心,陕西,西安,710033;第四军医大学药学系生物技术中心,陕西,西安,710033 |
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基金项目: | 教育部长江学者和创新团队发展计划 |
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摘 要: | 目的: 构建人转化生长因子-β1(TGF-β1)基因的原核表达载体,表达并纯化GST-hTGFβ1. 方法: 应用RT-PCR获得人TGF-β1的基因片段,成功构建人TGF-β1原核表达载体,诱导表达人TGF-β1与GST的融合蛋白;应用亲和层析法纯化重组融合蛋白,对纯化产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western Blot检测分析. 结果: 成功构建了人TGF-β1重组融合表达质粒pGEX-4T-1-TGF-β1, 表达的蛋白经SDS-PAGE电泳分析,在Mr约为39×103处出现了一条新生的蛋白条带,该表达蛋白具有与TGF-β1抗体特异性的结合能力. 结论: 成功构建了人TGF-β1基因的原核表达载体并纯化了该基因的原核表达产物,为下一步的人TGF-β1自体疫苗的研制奠定了基础.
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关 键 词: | 转化生长因子-β1 重组融合蛋白/分离与纯化 pGEX-4T-1载体 |
文章编号: | 1000-2790(2006)03-0193-03 |
收稿时间: | 2005-11-11 |
修稿时间: | 2005-12-01 |
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