| 人细胞色素CYP2E1基因重组杆状病毒粘粒构建 |
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| 引用本文： | 徐田雪,吴丽霞,游雪甫.人细胞色素CYP2E1基因重组杆状病毒粘粒构建[J].中国公共卫生,2008,24(6):683-684. |
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| 作者姓名： | 徐田雪 吴丽霞 游雪甫 |
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| 作者单位： | 1. 中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所药理室,北京,100050
2. 沈阳医学院沈洲医院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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国家科技重大专项基金
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北京市自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建人细胞色素P450 2E1(CYP2E1)基因cDNA重组的杆状病毒粘粒.方法 采用PCR方法,从国外获赠的含有CYP2E1基因cDNA的质粒中扩增CYP2E1 cDNA.将该基因的cDNA连接到测序载体pCMV-Myc载体上,通过内切酶分析及测序加以鉴定,然后将该基因的cDNA克隆到转座载体pFASTBac1载体,转化入DH10Bac大肠埃希菌感受态细胞中,提取含有CYP2E1基因的重组杆状病毒粘粒,并经PCR鉴定分析.结果 测序结果显示,该克隆片段含有CYP2E1完整的编码区,所获得的重组杆状病毒粘粒含有完整1.5kb大小的该片段.结论 获得重组CYP2E1杆状病毒粘粒,为下一步转染昆虫细胞,利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统大量表达人细胞色素P450 2E1蛋白打下基础.
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| 关 键 词： | 细胞色素P450 基因克隆 杆状病毒 PCR 人细胞色素 基因重组 病毒 粘粒 baculovirus expression system bacmid recombinant construction human identification 蛋白 毒表达系统 利用 昆虫细胞 转染 大小 编码区 显示 结果 鉴定分析 |
Cloning and identification of human CYP2E1 cDNA and construction of its recombinant bacmid DNA for baculovirus expression system |
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| XU Tian-xue,WU Li-xia,YOU Xue-fu.Cloning and identification of human CYP2E1 cDNA and construction of its recombinant bacmid DNA for baculovirus expression system[J].Chinese Journal of Public Health,2008,24(6):683-684. |
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| Authors: | XU Tian-xue WU Li-xia YOU Xue-fu |
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