补肾法通过三羧酸循环酶改善重复控制性卵巢刺激模型小鼠2-细胞胚胎发育潜能

目的 通过观察胚胎合子基因组激活期(ZGA)三羧酸循环(TCA)酶和表观遗传修饰的关系，研究补肾调经方改善重复控制性卵巢刺激(COS)模型小鼠的2-细胞胚胎发育潜能。方法 将动情周期正常的雌性小鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、补肾低剂量组和补肾高剂量组，每组25只。除正常组外，其余各组小鼠建立COS模型。模型组和补肾低、高剂量组每日上午9时分别灌胃蒸馏水、补肾调经方低剂量(25.6 g/kg)和高剂量(51.2 g/kg),连续10 d。于第11天16时腹腔注射孕马血清促性腺激素(PMSG)10 IU/只，第13天16时腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)10 IU/只；正常组注射生理盐水0.1 mL。灌胃及腹腔注射连续3个周期，每个周期间隔4 d。各组小鼠第3次腹腔注射后立即与同品系雄性小鼠合笼。次日清晨见栓或阴道涂片见精子的雌鼠记为妊娠。妊娠小鼠于末次腹腔注射hCG后44～46 h处死，在倒置显微镜下取出2-细胞胚胎观察形态并计数。免疫荧光法检测2-细胞胚胎丙酮酸脱氢酶(PDH)、柠檬酸合成酶(CS)、异柠檬酸脱氢酶(IDH3A)、性别决定区Y框蛋白2(SOX2)、组蛋白3第...