SSA抗原真核表达载体的构建 |
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引用本文: | 郑宗富,兰小鹏,杨湘越,苏东辉.SSA抗原真核表达载体的构建[J].中国误诊学杂志,2008,8(17):4040-4042. |
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作者姓名: | 郑宗富 兰小鹏 杨湘越 苏东辉 |
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作者单位: | 1. 南京军区福州总院四七六临床部检验科,350002 2. 南京军区福州总医院全军检验医学研究所 3. 福建医科大学 |
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基金项目: | 本课题获福建省青年人才科技创新基金资助项目(编号:2002J060) |
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摘 要: | 目的:通过基因克隆构建表达人干燥综合征抗原A(SSA)的巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体。方法:从人白血病淋巴细胞HL60株中提取RNA,反转录出cDNA,然后以cDNA为模板,通过PCR法扩增目的基因SSA,经纯化、双酶切、DNA浓缩回收,插入到酵母分泌型表达载体pPIC9k,用热冲击法转化感受态细胞DH5a,筛选阳性克隆提取质粒,双酶切鉴定并测序。结果:PCR产物大小符合要求,重组质粒pPIC9k-SSA双酶切鉴定与预期一致,测序结果正确。结论:成功构建SSA毕赤酵母分泌型表达载体,为今后获取高纯度、高产量的SSA抗原,研制新型抗SSA诊断试剂盒作前期准备。
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关 键 词: | 干燥综合征/免疫学 核糖核蛋白类/遗传学/生物合成 转染 毕赤酵母/遗传学 遗传载体 |
文章编号: | 1009-6647(2008)17-4040-03 |
修稿时间: | 2008年1月13日 |
Construction of Eukaryotic Expression Vector of SSA Antigen |
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Institution: | ZHENG Zong fu,LAN Xiao-peng,YANG Xiang yue,et al. (476 Hospital of Fuzhou General Hospital of PLA,Fuzhou 350002, China) |
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Abstract: | |
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Keywords: | Sjogren's Syndrome/immunology Ribonucleoproteins/genetics/biosynthesis Transfection Pichia/geneties Genetic Vectors |
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