| 分泌型PD-L1真核表达载体的构建、表达及其体外效应的初步研究 |
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| 引用本文： | 胡萍,季煜华,李君武,林绍强,韦静,李小兰,黄泽棋.分泌型PD-L1真核表达载体的构建、表达及其体外效应的初步研究[J].中华微生物学和免疫学杂志,2006,26(11):1009-1012. |
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| 作者姓名： | 胡萍 季煜华 李君武 林绍强 韦静 李小兰 黄泽棋 |
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| 作者单位： | 1. 510632 广州,暨南大学医学院微生物和免疫学教研室
2. 暨南大学组织移植与免疫中心 |
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| 基金项目： | 暨南大学引进人才启动基金（51205072）;广东省医学科研基金（A2006335） |
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| 摘 要： | 目的 构建分泌型PD-L1真核表达载体，并对其生物学活性进行初步研究。方法以RT-PCR方法从孕鼠胎盘中获得程序性死亡因子-1（programmed death-1，PD-1）配体PD-L1的胞外段基因片段，定向连接于pcDNA3．1上构建真核表达载体pcDNA-PDL1；用脂质体将重组子导入NTT细胞，转染后的NTT命名为NITp。以Western blot鉴定重组蛋白的表达。MTT比色法检测NITp细胞培养上清对同种混合淋巴细胞培养反应的影响；用ELISA试剂盒检测NITp细胞培养上清对反应性T细胞分泌的细胞因子的影响。结果 RT-PCR得到约730bp目的基因片段，测序结果显示该目的基因与Gen-Bank上的序列相符；Western blot分析提示NTTp分泌性表达目的蛋白；NTTp培养上清可抑制混合淋巴细胞增殖，其效应呈剂量依赖性；反应性T细胞分泌的细胞因子检测结果显示，培养上清中IL-4、IFN-γ、IL-2水平降低，与正常对照组差异有统计学意义。结论 成功构建PD-L1基因真核表达载体pcDNA-PDL1，PD-L1蛋白对同种细胞刺激的增殖反应有抑制作用，并可在一定程度上抑制特异性T细胞的活化。
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| 关 键 词： | PD-L1 混合淋巴细胞培养 细胞因子 1型糖尿病 |
| 收稿时间： | 2006-05-24 |
| 修稿时间： | 2006年5月24日 |
Vector construction and expression of secreted PD-L1 and the elemental study of the effect in vitro |
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| HU Ping,JI Yu-hua,LI Jun-wu,LIN Shao-qiang,WEI jing,LI Xiao-lan,HUANG Ze-qi.Vector construction and expression of secreted PD-L1 and the elemental study of the effect in vitro[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2006,26(11):1009-1012. |
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| Authors: | HU Ping JI Yu-hua LI Jun-wu LIN Shao-qiang WEI jing LI Xiao-lan HUANG Ze-qi |
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| Institution: | Department of Microbiology and Immunology, Medical College of Ji-nan University, Guangzhou 510632, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PD-L1 Mixed lymphocyte culture Cytokine Type 1 diabetes mellitus(T1DM) |
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