Smad4小分子干扰RNA对转化生长因子-β诱导的纤溶酶原激活物抑制剂-1表达的影响 |
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作者姓名: | 郭宝良 仲雷 闫朝歧 张建国 邹小明 杨宝峰 |
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作者单位: | 1. 哈尔滨医科大学附属第二医院普外科,150086 2. 哈尔滨医科大学附属第二医院药学院,150086 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,黑龙江省教育厅海外学人科研资助重点项目,黑龙江省自然科学基金,中国博士后科学基金,中国教育部留学归国人员科研启动基金 |
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摘 要: | 目的 探讨Smad4小分子干扰RNA(siRNA)对转化生长因子(TGF)-β诱导纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)-1的表达的影响及作用机制.方法 将Smad4 siRNA转染入肝星状细胞24h后行TGF-β(1μg/L)刺激,24、48 h后收集细胞.利用萤光素酶报告基因法测定Smad结合转写因子的活性;Northern印迹分析技术检测PAI-1 mRNA表达的变化;Western印迹分析观察Smad4蛋白、PAI-1蛋白的变化.结果 Smad4 siRNA能抑制Smad4蛋白(3.0±0.1比16.0±0.5)表达;Smad4 siRNA抑制TGF-β1和ALK5激活的4×SBE荧光素酶报告基因活性;TGF-β时间依赖性促进PAI-1 mRNA表达,24 h达高峰;Smad4 siRNA从mRNA(1.3±0.1比6.5±0.2)和蛋白(1.50±0.15比5.52±0.36)水平抑制TGF-β激活的PAL-1的表达.结论 Smad4 siRNA能够有效地阻断TGF-β诱导的PAI-1表达.
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关 键 词: | 纤溶酶原激活抑制因子-1 RNA干扰 转化生长因子-β |
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