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病毒RNA提取试剂对甲型流感病毒的灭活效果
引用本文:刘洪波,吴衍恒,朱远峰,梁洪,周日东.病毒RNA提取试剂对甲型流感病毒的灭活效果[J].中国热带医学,2011,11(7):812-814.
作者姓名:刘洪波  吴衍恒  朱远峰  梁洪  周日东
作者单位:1. 中山市疾病预防控制中心,广东中山,528403;华中科技大学同济医学院,湖北武汉,430030
2. 中山市疾病预防控制中心,广东中山,528403
摘    要:目的测试病毒RNA提取试剂(硅胶柱法和改良异硫氰酸胍法)灭活甲型流感病毒的能力,以评估在低防护区操作甲型流感病毒核酸提取过程的可能性。方法根据试剂盒操作指导分别用两种提取试剂的裂解液Bufier AVL(德国QIAGEN)MGTC溶液(广州华银)处理一甲型流感2009年大流行株(105.67TCID50/ml);系列对数稀释病毒处理液后接种于MDCK细胞单层进行分离培养;倒置显微镜每日观察细胞生长状态,出现75%以上病变后收获培养物进行血凝实验测定。同时设置试剂对照以了解试剂的细胞毒性,病毒对照以确定病毒的感染能力。结果未稀释和10倍稀释的两种裂解液都可引起MDCK大范围死亡,两病毒对照感染细胞的终点稀释度都为10^4,而所有10^2稀释度以上的病毒处理液培养孔细胞生长良好,血凝实验阴性。结论两种病毒RNA提取试剂可以完全灭活高滴度的甲型流感病毒,标本裂解处理后可在低防护区域操作。

关 键 词:甲型流感病毒  分离和纯化  病毒灭活  生物安全防护  异硫氰酸胍

Evaluation of effect of two viral RNA extraction reagents on the capability of inactivating influenza A virus
LIU Hong-bo,WU Yan-heng,ZHU Yuan-feng,et al..Evaluation of effect of two viral RNA extraction reagents on the capability of inactivating influenza A virus[J].China Tropical Medicine,2011,11(7):812-814.
Authors:LIU Hong-bo  WU Yan-heng  ZHU Yuan-feng  
Institution:LIU Hong-bo,WU Yan-heng,ZHU Yuan-feng,et al.(1.Zhongshan Municipal Center for Disease Control and Prevention,Zhongshan 528403,Guangdong,P.R.China)
Abstract:Aim To evaluate the feasibility of processing samples of influenza A virus outside of biological containment areas by examining the capability of two common viral RNA extraction techniques(silica column-based method and modified guanidine thiocyanate method) to inactivate influenza A virus.Methods A Pandemic influenza A(H1N1) virus 2009 isolate(105.67TCID50/ml) was processed respectively with buffer AVL(QIAGEN,Germany) and MGTC buffer(HUARUIAN,China) according to manufacturer's instructions.The virus-lysis ...
Keywords:Influenza A virus  Isolation and purification  Virus inactivation  Containment of biohazards  Guanidinium thiocyanate  
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