| 具有谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）活力的抗体酶研究──单克隆抗体的制备及化学诱变 |
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| 引用本文： | 刘子,朱振奇,丁兰,冯书章,罗贵民,杨同书,沈家骢.具有谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）活力的抗体酶研究──单克隆抗体的制备及化学诱变[J].细胞与分子免疫学杂志,1996(3). |
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| 作者姓名： | 刘子 朱振奇 丁兰 冯书章 罗贵民 杨同书 沈家骢 |
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| 作者单位： | 长春解放军农牧大学军事兽医研究所，吉林大学酶工程国家重点实验室，长春白求恩医科大学地方病研究所，吉林大学分子光谱和结构开放实验室 |
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| 摘 要： | 将２，４－二硝基氯苯（ＤＮＣＢ）专一地与底物谷胱甘肽（ＧＳＨ）巯基反应，合成了半抗原ＧＳＨ－Ｓ－ＤＮＰ；通过蛋白质连接技术（戊二醛法）将此半抗原偶联到牛血清白蛋白（ＢＳＡ）上，制备出全抗原。用吸收光谱测得每个ＢＳＡ分子上平均连接３３个半抗原。用全抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过淋巴细胞杂交瘤技术，制备出抗ＧＳＨ的单克隆抗体杂交瘤细胞系４Ａ４、６Ａ６、１Ｃ８和４Ｇ３等。将其中的４Ａ４培养上清经５０％（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀、ＤＥＡＥ－５２纤维素离子交换柱层析和ＢｉｏｇｅｌＰ－２００凝胶过滤分离得到４Ａ４ＩｇＧ抗体，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检验纯度大于９０％。４Ａ４ＩｇＧ可变区中的丝氨酸（Ｓｅｒ）经苯甲基磺酰氟（ＰＭＳＦ）活化，再用硒化氢（Ｈ２Ｓｅ）处理，则Ｓｅｒ转变成硒代半胱氨酸（ＳｅＣｙｓ），使４Ａ４ＩｇＧ引入该催化基因。化学诱变后的４Ａ４ＩｇＧ具有谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）活性，其活力是世界上最好的ＧＰＸ模拟物ＰＺ５１的１１００倍，是游离ＳｅＣｙｓ的２．２×１０４倍，已达到天然酶活力的数量级水平。经初步应用，该抗体酶可防止自由基对心肌线粒体的损伤。
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| 关 键 词： | 单克隆抗体 化学诱变 谷胱甘肽过氧化物酶 |
Study on Abzyme with Activity of Glutathione Peroxidase(GPX) Preparation and Chemical Mutation of Monoclonal Antibodies |
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| Liu Zi,et al..Study on Abzyme with Activity of Glutathione Peroxidase(GPX) Preparation and Chemical Mutation of Monoclonal Antibodies[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,1996(3). |
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| Authors: | Liu Zi |
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| Keywords: | monoclonal antibody chemical mutation glutathione peroxidase(GPX) |
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