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6His-hEra融合蛋白的高效表达
引用本文:纪宗玲,陈苏民,刘继中,李毅,吴元明,张晓楠.6His-hEra融合蛋白的高效表达[J].中国免疫学杂志,2002,18(11):752-754.
作者姓名:纪宗玲  陈苏民  刘继中  李毅  吴元明  张晓楠
作者单位:1. 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,西安,710032
2. 西京医院骨科研究所
基金项目:国家自然科学基金资助 (No3 0 0 0 0 0 91,3 9870 3 80 )
摘    要:目的 :在原核表达系统中对人Era基因进行表达。方法 :人era编码区基因克隆入pUC19质粒中 ,经全自动序列分析仪测序正确后 ,再克隆入表达载体pRSETB中 ,构建成融合 6个组氨酸的高效表达载体pRSETB Era ,转化大肠杆菌BL2 1DE3(plysS)诱导表达。结果 :经IPTG诱导后 4h ,SDS PAGE及凝胶密度扫描分析 ,表达出分子量约 4 1kD的蛋白 ,占菌体总蛋白的 5 1 2 %。结论 :该基因在大肠杆菌中的高效表达为人era的功能研究打下了基础。

关 键 词:人Era  GTP结合蛋白  表达  测序
文章编号:1000-484X(2002)11-0752-03

High level expression of 6His-hEra
JI Zong Ling,CHEN Su Min,LIU Ji Zhong et al.High level expression of 6His-hEra[J].Chinese Journal of Immunology,2002,18(11):752-754.
Authors:JI Zong Ling  CHEN Su Min  LIU Ji Zhong
Institution:JI Zong Ling,CHEN Su Min,LIU Ji Zhong et al.Department of Biochemistry and Molecular Biology,Fourth Military Medical University,Xi'an 710032
Abstract:Objective:To study the expression of human Era.Methods:The encoding region of human Era gene was inserted into pUC19 plasmid and sequenced,the gene fragment was then cloned into the prokaryotic fusion expression vector pRSET B to contruct recombinant expression plasmid pRSET B hEra.The recombinant protein was expressed in E.coli BL21DE3(plys S).Results:6His hEra was expressed after induced by IPTG and took 51.2% of the total cell lysate and mainly existed in the inclusion body.Conclusion:High level of human Era was established and this result may shed light on the further study on function of human Era.
Keywords:Human Era  GTP  binding protein  Expression  Sequence
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