重组改构人TNF逆转卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP的耐药性及其机制

目的: 探讨重组改构人肿瘤坏死因子（recombinant mutant human tumor necrosis factor, rmhTNF）体外逆转人卵巢癌多药耐药细胞株SKOV3/DDP的耐顺铂（cisplatin,又称DDP）效应及其可能存在的作用机制。方法: 体外培养人卵巢癌多药耐药细胞株SKOV3/DDP，以MTT法检测rmhTNF对此耐药株的细胞毒作用，确定其对此细胞株的无毒剂量;同法测定无毒剂量rmhTNF干预后SKOV3/DDP对顺铂耐药性的变化，通过流式细胞术检测rmhTNF干预不同时间段SKOV3/DDP细胞株中GSTπ蛋白的表达，RTPCR方法分析rmhTNF处理SKOV3/DDP细胞前后MDR1基因的表达水平。结果: （1）50～12234 U/ml rmhTNF对SKOV3/DDP细胞增殖无明显抑制作用（细胞存活率均﹥90%），因此选用100 U/ml 作为逆转剂量（无毒剂量）;（2）单用DDP 24、48、72 h 的IC50为(23.29±0.43)、(8.97±0.69)、(6.43±0.79)μg/ml，联合100 U/ml rmhTNF和DDP用药使SKOV3/DDP的IC50分别降至（19.50±0.50）、（4.34±0.43）、（2.44±0.02）μg/ml，逆转倍数分别为1.19、206、2.64倍;（3）100 U/ml rmhTNF干预0、24、48、72 h后SKOV3/DDP细胞内GSTπ蛋白的表达随作用时间延长降低，MDR1基因的表达随作用时间延长降低。结论: rmhTNF对SKOV3/DDP有逆转耐药作用，其机制可能与下调GSTπ蛋白及MDR1基因表达有关。

Recombinant mutant human TNF in reversing drug resistance in ovarian cancer cell line SKOV3/DDP and the related mechanism