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采用组织贴壁法从整根脐带分离培养间充质干细胞及其生物学特性的研究
引用本文:张颢,张斌,程梅,陶艳玲,扈江伟,徐曼,陈虎.采用组织贴壁法从整根脐带分离培养间充质干细胞及其生物学特性的研究[J].基础医学与临床,2012,32(1):71-76.
作者姓名:张颢  张斌  程梅  陶艳玲  扈江伟  徐曼  陈虎
作者单位:1. 哈尔滨市第一医院 哈尔滨血液病肿瘤研究所,黑龙江 哈尔滨 150010;军事医学科学院 附属医院造血干细胞移植科,北京 100071
2. 军事医学科学院 附属医院造血干细胞移植科,北京,100071
3. 哈尔滨市第一医院 哈尔滨血液病肿瘤研究所,黑龙江 哈尔滨,150010
基金项目:国家高技术研究发展计划项目(863项目),军队临床高新技术重大项目,黑龙江省卫生厅科研课题,首都临床特色应用研究,哈尔滨市科技创新人才研究专项基金
摘    要: 为了建立从整根脐带中分离培养间充质干细胞(UC-MSCs)的技术,并对其生物学特性进行研究。采用组织贴壁法分离UC-MSCs, 并通过传代进行纯化和扩增培养, 绘制生长曲线:用流式细胞仪检测UC-MSCs表面抗原及细胞周期; 在特定诱导体系中,检测UC-MSCs向脂肪、成骨及软骨分化的能力;采用RT-PCR检测多能干细胞标志多能干细胞标志Oct4, Sox-2, Nanog mRNA水平。结果表明, 成功建立了UC-MSCs分离培养的方法;流式细胞仪检测结果显示, 贴壁细胞均表达CD73 、CD90 、CD105, 不表达造血细胞表型CD34、CD45 和HLA-DR ;细胞倍增时间为(24.04±0.49)h , 细胞周期分析表明,G0~G1 期和S+ G2 + M 期所占比例分别为81.56 %和18.44%;UC-MSCs能够向脂肪、成骨和软骨分化;表达Oct4, Sox-2, Nanog基因。结论:组织贴壁法是一种较好的分离培养UC-MSCs的方法,培养的细胞为具有增殖能力强和更原始间充质干细胞,为建立间充质干细胞库和临床应用提供了理论依据。

关 键 词:脐带  间充质干细胞  分化  成骨细胞  脂肪细胞  软骨细胞  

Isolation and characterization of mesenchymal stem cells derived from whole human umbilical cord by applying a direct explant technique
ZHANG Hao , ZHANG Bin , CHENG Mei , TAO Yan-Ling , HU Jiang-Wei , XUN Man , CHEN Hu.Isolation and characterization of mesenchymal stem cells derived from whole human umbilical cord by applying a direct explant technique[J].Basic Medical Sciences and Clinics,2012,32(1):71-76.
Authors:ZHANG Hao  ZHANG Bin  CHENG Mei  TAO Yan-Ling  HU Jiang-Wei  XUN Man  CHEN Hu
Institution:1.Harbin Institute of Hematology & Oncology,First Hospital of Harbin,Harbin 150010;2.Dept.of Hematopoietic Stem Cell Transplantation, the Affiliated Hospital to Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100071,China)
Abstract:
Keywords:umbilical cord  mesenchymal stem cell  differentiation
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