| 胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因转录因子的效应 |
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| 引用本文： | 吴艳芳,郭林霞,乐晓萍,丁一.胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因转录因子的效应[J].解剖学报,2013,44(2):219-223. |
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| 作者姓名： | 吴艳芳 郭林霞 乐晓萍 丁一 |
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| 作者单位： | 1. 郑州大学基础医学院组织学胚胎学教研室,郑州450001;新乡医学院基础医学院人体解剖学实验室,河南新乡453003
2. 郑州大学基础医学院组织学胚胎学教研室,郑州,450001 |
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| 基金项目： | 河南省医学科技攻关计划资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ(Reg Ⅰ)基因转录因子的效应.方法 应用巢式PCR技术从胃癌细胞SGC7901基因组DNA扩增Reg Ⅰ基因启动子1414bp片段,将该片段插入pMD19-T载体,序列分析鉴定.应用随机引物法以地高辛分别标记1414bp及其HindⅢ酶切800bp和614bp片段,经灵敏度检测后,作为探针.应用Genomatix MatInspector在线分析软件分析Reg Ⅰ基因启动子1414bp片段的转录因子结合位点.分别以10-7 mol/L和10-8mol/L胃泌素G-17处理胃癌细胞SGC7901 48h,提取核蛋白.应用DNA-蛋白质印迹法(Southern blotting),分别以地高辛标记的1414bp、800bp和614bp片段为探针检测胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因转录因子的效应.结果 1414bp探针可检测到20条蛋白主带.胃泌素孵育后,带型没有变化,但是一些条带的灰度值改变,带9、12、13、14、15和16的灰度值明显降低(P＜0.05)；不同浓度胃泌素处理组之间上述6个条带的灰度值差异不明显(P＞0.05).614bp探针可检测到灰度值变化的6条主带中的带9、12和13,胃泌素处理后,此3条主带的灰度值明显降低(P＜0.05).800bp探针可检测到灰度值变化的6条主带中的带9、12和14,胃泌素处理后,仅带14的灰度值明显降低(P＜0.05).614bp和800bp探针均未检出带15和带16.结论 胃癌细胞SGC7901Reg Ⅰ基因表达由多个转录因子协同调控.降低几个转录因子的结合活性可能是胃泌素上调胃癌细胞SGC7901Reg Ⅰ基因表达的途径之一.
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| 关 键 词： | Reg Ⅰ基因 胃泌素 转录因子 胃癌细胞 DNA-蛋白质印迹法 |
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