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| 西农萨能奶山羊β酪蛋白基因5′侧序列通用表达载体的构建 | |
| 作者姓名： | 朱婧 梁克明 童德文 陈苏民 窦忠英 |
| 作者单位： | 西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心 陕西杨凌712100(朱婧，童德文)，第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室 陕西西安710033(梁克明，陈苏民)，西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心 陕西杨凌712100(窦忠英) |
| 摘 要： | 目的:检测β酪蛋白基因5′侧序列的启动BglⅡ效果及构建真核表达载体pcDNA3.165.方法:采用SalⅠ和BamHⅠ对pMDT/65双酶切,得到6465bp的β酪蛋白基因5′侧序列;将启动子片段插入到XhoⅠ和BglⅡ双酶切后的pGL3Basic载体里;获得重组报告基因载体pGL3B65.瞬时转染西农萨能奶山羊原代培养的乳腺上皮细胞,检测β酪蛋白基因5′侧序列的启动效果.将β酪蛋白基因5′侧序列插入真核表达载体pcDNA3.1(-)的XhoⅠ和BamHⅠ位点之间,从而获得载体pcDNA3.165.结果:长度为6465bp的β酪蛋白基因5′侧序列能有效地启动荧光素酶报告基因,并正确构建了真核表达载体pcDNA3.165.结论:克隆的β酪蛋白基因5′侧序列在转录水平上具有生物学功能,为进一步建立转基因动物乳腺生物反应器奠定了坚实的基础. |
| 关 键 词： | β-酪蛋白基因5′侧序列 西农萨能奶山羊 通用表达载体 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |