| 肺癌细胞株APC基因启动子甲基化对其转录的影响 |
| |
| 引用本文： | Zhang LX,Pan SY,Chen D,Xie EF,Gao L,Shu YQ,Lu ZH,Cheng L,Yang D,Zhang JN. 肺癌细胞株APC基因启动子甲基化对其转录的影响[J]. 癌症, 2007, 26(6): 576-580 |
| |
| 作者姓名： | Zhang LX Pan SY Chen D Xie EF Gao L Shu YQ Lu ZH Cheng L Yang D Zhang JN |
| |
| 作者单位： | 南京医科大学第一附属医院临床检验中心,江苏,南京,210029;南京医科大学第一附属医院肿瘤科,江苏,南京,210029;东南大学生物科学与医学工程系,江苏,南京,210096;南京医科大学第一附属医院心脏病研究所,江苏,南京,210029 |
| |
| 基金项目： | 江苏省135重点实验室项目 , 江苏省卫生厅面上项目 |
| |
| 摘 要： | 背景与目的:抑癌基因家族性腺瘤样结肠息肉病易感基因(adenomatous polyposis coli,APC)启动子区的高甲基化在很多肿瘤中被发现,与这些肿瘤的发生发展相关.本实验室在肺癌患者肿瘤组织中检测到APC甲基化率达47%,为了研究其在肺癌细胞株中的甲基化情况,并进一步了解甲基化对其转录的影响,本研究检测了3株肺癌细胞的抑癌基因APC启动子甲基化状态及其对该基因转录水平的影响.方法:提取3株肺癌细胞株(肺腺癌细胞株SPC-A1、小细胞肺癌细胞株NCI-H446、大细胞肺癌细胞株NCI-H460)的DNA,以经转甲基处理和未做处理的脐带血DNA为阳性、阴性对照,亚硫酸氢盐化学修饰后,用甲基化特异性基因扩增(methylation specific-polymerase chain reaction,MSP)和甲基化基因芯片对APC基因启动子1A CpG岛甲基化进行研究,并用实时荧光定量PCR(real time-polymerase chain reaction)技术,以Sybr-GreenⅠ为荧光染料,β-actin基因为内参照,检测mRNA转录;对甲基化阳性的NCI-H460细胞,分别用1、5、10、15 μmol/L的5'-杂氮-2'-脱氧胞嘧啶(5-aza-2-deoxycytidine,5-aza-dC)试剂进行脱甲基化,提取RNA,荧光定量检测其转录变化.结果:SPC-A1和NCI-H446细胞APC甲基化阴性,NCI-H460细胞APC甲基化阳性;甲基化芯片检测NCI-H460细胞在APC启动子1A 5个CpG位点均存在甲基化(687、707、714、719、726),SPC-A1和NCI-H446甲基化阴性,荧光定量结果NCI-H460的APC转录较SPC-A1和NCI-H446有明显的下降,仅为二者平均的30.04%;经5-aza-dC脱甲基化作用后,NCI-H460细胞的APC表达增加了约5～10倍,其中10 μmol/L浓度作用下,APC表达增加最多.结论:肺癌细胞株NCI-H460中存在APC基因高甲基化,5-aza-dC脱甲基化试剂可以激活其转录.
|
| 关 键 词： | 肺癌细胞株 APC MSP 甲基化芯片 5-aza-dC 实时荧光定量PCR |
| 文章编号： | 1000-467X（2007）06-0576-05 |
| 修稿时间： | 2006-10-302006-12-18 |
Effect of adenomatous polyposis coli(APC) promoter methylation on gene transcription in lung cancer cell lines |
| |
| Zhang Li-Xia,Pan Shi-Yang,Chen Dan,Xie Er-Fu,Gao Li,Shu Yong-Qian,Lu Zu-Hong,Cheng Lu,Yang Di,Zhang Ji-Nan. Effect of adenomatous polyposis coli(APC) promoter methylation on gene transcription in lung cancer cell lines[J]. Chinese journal of cancer, 2007, 26(6): 576-580 |
| |
| Authors: | Zhang Li-Xia Pan Shi-Yang Chen Dan Xie Er-Fu Gao Li Shu Yong-Qian Lu Zu-Hong Cheng Lu Yang Di Zhang Ji-Nan |
| |
| Affiliation: | 1.Center of Clinical Laboratory,First Afftliated Hospital,Ntmjing Medical University, Nanjing, Jiansu, 210029, P.R.China;2.Department of Oncology, The First Affliated Hospital, Nanjing Medical University, Nanjing, Jiangsu, 210029, P.R.China;3. Department of Biological Science and Medical Engineering, Southeast University, Najing,Jiangsu, 210096, P.R.China; 4.Department of Cwrdiovascular Disease, The First Affiliated Hospital, Nanjing Medical University, Nanjing, Jiangsu, 210029, P. R. China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Lung neoplasm SPC-A1 cell NCI-H446 cell NCI-H460 cell APC Methylation-specific polymerase chain reaction (MSP) Methylation-specific microarray 5-Aza-2-deoxycytidine Real-time quantitative PCR |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 PubMed 等数据库收录！ |
|
