高效液相色谱(HPLC)法测血清维生素C含量

目的建立更简便、快速、准确、灵敏的测定血清维生素C含量的方法,并对血清维生素C稳定性进行研究。方法血清样品经10%(v/v)偏磷酸溶液提取,旋涡混匀30s,离心10min(4000r/min,4℃)后,用带二极管阵列检测(DAD)的高效液相色谱(HPLC)仪对维生素C进行定性定量分析,流动相为100mmol/LKH2PO4,pH值为3.0,检测波长为243nm,流速为1ml/min。用此方法测定不同处理和储存条件下的血清维生素C含量,比较其稳定性。结果在上述色谱条件下,血清中维生素C能得到良好分离,该方法的日内变异系数和日间变异系数分别为0.42%和2.11%;回收率范围为82%～88.5%;维生素C的最低检测限为0.05μg/ml。在对血清维生素C稳定性的研究中,发现血清维生素C在放置过程中很容易被氧化降解,其偏磷酸提取液相对稳定,但在5d后含量也开始明显下降,到第44d后血清和提取液中维生素C含量均几乎完全消失。结论建立了高速、高效、高灵敏度的测定血清维生素C含量的HPLC法;血清维生素C在保存过程中极不稳定,获得样品后应立即测定,当无条件立即分析样品时,也应将样品用偏磷酸提取,并将提取液冷冻保存在-70℃,5d以内分析完毕。

Determination of Vitamin C in Serum by HPLC