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表达呼吸道合胞病毒F蛋白编码基因的重组腺病毒载体的构建
引用本文:王潇潇,李秀玲,赵铠.表达呼吸道合胞病毒F蛋白编码基因的重组腺病毒载体的构建[J].中华微生物学和免疫学杂志,2009,29(5).
作者姓名:王潇潇  李秀玲  赵铠
作者单位:北京生物制品研究所,100024
摘    要:目的 构建表达呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)F蛋白编码基因片段的重组腺病毒.方法 以RSV RNA为模板,利用RT-PCR扩增出F基因片段,应用AdEasy腺病毒载体系统,构建含有目的 基因的蕈组穿梭质粒pShuttle-CMV/F,再转化含有骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183-AD-1获得重组腺病毒质粒pAdEasy/F.将该质粒转染293细胞包装产生出重组腺病毒rAd/F.重组腺病毒分别经电子显微镜技术、RT-PCR、Western blot和间接免疫荧光方法进行鉴定.并对该重组腺病毒的滴度和遗传稳定性进行了初步研究.结果 获得了含有RSV F基因片段的重组腺病毒rAd/F,电子显微镜下可见典型腺病毒颗粒形态,RT-PCR、Western blot和间接免疫荧光方法分析显示rAd/F中的F基因片段可以在293细胞中有效转录和表达.结论 成功构建出含有RSV F基因片段的苇组腺病毒rAd/F,为进一步研究重组腺病毒载体疫苗奠定了基础.

关 键 词:呼吸道合胞病毒  融合蛋白  腺病毒载体

Construction of recombinant adenoviras expressing RSV F gene
WANG Xiao-xiao,LI Xiu-ling,ZHAO Kai.Construction of recombinant adenoviras expressing RSV F gene[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2009,29(5).
Authors:WANG Xiao-xiao  LI Xiu-ling  ZHAO Kai
Abstract:
Keywords:Respiratory syncytial virus  Fusion protein  Adenovirus vector
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