| 黄花蒿ISSR-PCR反应体系的优化 |
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| 引用本文： | 邓婧,陈新. 黄花蒿ISSR-PCR反应体系的优化[J]. 成都中医药大学学报, 2006, 29(3): 51-53 |
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| 作者姓名： | 邓婧 陈新 |
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| 作者单位： | 成都中医药大学,药学院,四川,成都,610075;成都中医药大学,药学院,四川,成都,610075 |
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| 基金项目： | 国家中医药管理局科研项目 |
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| 摘 要： | 目的:建立黄花蒿(Artemisia annuaL.)的ISSR最佳反应体系及PCR扩增参数,为今后利用ISSR标记技术开展黄花蒿种间遗传多样性分析提供一个标准化程序。方法:以黄花蒿DNA为材料,分析了ISSR反应体系中的DNA、Mg2 、dNTPs浓度,TaqDNA聚合酶用量以及退火温度对ISSR-PCR扩增的影响。结果:建立了重复性好,分辨率高的ISSR反应体系,即在25μL反应体系中,模板DNA浓度为15~45 ng,2.5μL的10倍Buffer(Mg2 free)缓冲液,MgCl22.0 mmol/L,dNTPs为0.15 mmol/L,Taq酶1.0 U,引物1.0μmol/L;扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,引物在筛选后的最佳退火温度退火45 s,72℃延伸2 min,共计40个循环,循环结束后在72℃延伸5 min。结论:建立了适用于黄花蒿的ISSR反应体系,为今后利用ISSR标记技术开展黄花蒿种间遗传变异分析和构建遗传图谱奠定了基础。
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| 关 键 词： | 黄花蒿 ISSR反应体系 |
| 文章编号： | 1004-0668(2006)03-051-03 |
| 收稿时间： | 2006-05-27 |
| 修稿时间： | 2006-05-27 |
Optimization for the Reaction System of Southernwood ISSR-PCR |
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| DENG Jing,CHEN Xin. Optimization for the Reaction System of Southernwood ISSR-PCR[J]. Journal of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2006, 29(3): 51-53 |
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| Authors: | DENG Jing CHEN Xin |
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| Affiliation: | Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu, 610075, China |
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| Abstract: | Objective:In this paper,we analyzed the influence of DNA,Mg~(2 ),dNTPs and Taq DNA polymerase concentration,and annealing temperature of ISSR-PCR amplification,using the materials of southernwood DNA.The stable and reproducible optimal reaction system of amplification parameter was established.This result provided a standardizing process for the analysis of interspecies genetic diversity of southernwood. |
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| Keywords: | Southernwood(Artemisia annua L) ISSR reaction system |
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