复合聚合酶链反应检测绿脓杆菌、肺炎支原体及白色念珠菌的效果评价

目的：探讨复合聚合酶链反应（PCR）方法检测绿脓杆菌（PA ）、白色念珠菌（CA）和肺炎支原体（MP）DNA的效果。方法：选择PA外膜蛋白基因(OprI)、MP 45 000蛋白基因、CA 5SrRNA区特异的非转录区设计合成3对引物，探索用复合PCR方法检测3种病原体的反应体系和反应条件；针对设计合成的每1对引物，对3种支原体、4种细菌及2种真菌的DNA 进行PCR检测，观察引物的特异性；分别用PA、MP和CA标准菌株提取的DNA为模板，检测该反应对每一种病原体DNA的敏感性。结果：通过上述3对引物及一定的反应体系和反应条件所建立的复合PCR体系可以同时检测PA、CA及MP的DNA，分别出现275、684和144 bp的特异性扩增带，表明3对引物均具有较高的特异性，检测灵敏度PA可达1pg DNA，CA可达10pg DNA，MP可达100 fg DNA。结论：通过复合PCR方法可以同时检测出PA-DNA、CA-DNA和MP-DNA，具有快速、特异、敏感、简便及经济等优点。

Evaluation for detection of Pseudomonas aeruginosa,Mycoplasma pneumoniae and Candida albicans with multiplex polymerase chain reaction