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STUB1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定
引用本文:赵虹,张惊宇,徐万海,杨子超,赵庆杰. STUB1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定[J]. 浙江大学学报(医学版), 2010, 39(6). DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2010.06.012
作者姓名:赵虹  张惊宇  徐万海  杨子超  赵庆杰
作者单位:1. 哈尔滨医科大学,附属第四医院神经内科,黑龙江,哈尔滨,150001;哈尔滨医科大学,附属第一医院神经内科,黑龙江,哈尔滨,150001
2. 哈尔滨医科大学,附属第四医院神经内科,黑龙江,哈尔滨,150001
3. 哈尔滨医科大学,附属第四医院泌尿外科,黑龙江,哈尔滨,150001
4. 哈尔滨医科大学,附属第一医院神经内科,黑龙江,哈尔滨,150001
基金项目:黑龙江省自然科学基金面上资助项目 
摘    要:目的:构建人STUB1基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体并进行鉴定.方法:针对筛选确定的人STUB1 基因RNAi有效靶点序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经Age I 和EcoR I 酶切后的pMagic 4.0载体连接,产生短发卡RNA 慢病毒载体.PCR筛选阳性克隆,测序鉴定,并包装成慢病毒颗粒.结果:PCR鉴定与DNA测序证实,合成的含STUB1 shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确.STUB1 shRNA慢病毒载体在293T细胞中成功包装成慢病毒颗粒.结论:成功构建人STUB1基因RNAi慢病毒载体以及包装成功慢病毒颗粒,为研究STUB1在胶质瘤发生发展过程中相关信号通路的作用,提供了稳定感染细胞的载体.

关 键 词:慢病毒属/遗传学  遗传载体  RNA干扰  神经胶质瘤  聚合酶链反应  慢病毒载体

Construction and identification of lentiviral vector for RNA interference targeting STUB1 gene
ZHAO Hong,ZHANG Jing-yu,XU Wan-hai,YANG Zi-chao,ZHAO Qing-jie. Construction and identification of lentiviral vector for RNA interference targeting STUB1 gene[J]. Journal of Zhejiang University. Medical sciences, 2010, 39(6). DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2010.06.012
Authors:ZHAO Hong  ZHANG Jing-yu  XU Wan-hai  YANG Zi-chao  ZHAO Qing-jie
Abstract:
Keywords:STUB1  RNAi
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