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靶向腺病毒载体介导的EGFP基因在甲胎蛋白阳性肝癌细胞的特异表达
引用本文:石毓君,刘长安,龚建平,李旭宏,彭勇,梅英,米粲,霍艳英.靶向腺病毒载体介导的EGFP基因在甲胎蛋白阳性肝癌细胞的特异表达[J].中国病理生理杂志,2005,21(1):159-162.
作者姓名:石毓君  刘长安  龚建平  李旭宏  彭勇  梅英  米粲  霍艳英
作者单位:1重庆医科大学附属第二医院肝胆外科, 重庆 400010; 2 重庆医科大学病理学教研室, 重庆 400016;3 解放军军事医学科学院放射医学研究所, 北京 100850
基金项目:重庆市卫生局科研基金重点资助项目[2001]01-1-018
摘    要:目的:建立一种在甲胎蛋白(AFP)阳性的肝癌细胞中靶向表达目的基因的重组腺病毒载体。方法: 基于腺病毒载体Adeno-XTM Expression system,以300 bp AFP特异启动子替换穿梭质粒Pshuttle中CMV启动子,将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因作为报告基因亚克隆至Pshuttle,HEK293细胞包装腺病毒,收集病毒后分别转染人正常肝脏LO2细胞,人肝癌HepG2细胞及HeLa细胞;通过Northern杂交检测EGFP基因在3种细胞中的转录水平,荧光显微镜下观察3种细胞中绿色荧光蛋白的表达。结果:Northern杂交显示,HepG2细胞中有大量EGFP基因的转录,而正常肝细胞LO2和HeLa细胞中仅能检测到微量基因的转录;荧光显微镜检测发现HepG2细胞内有强绿色荧光表达,而在LO2以及HeLa细胞内见极弱绿色荧光。 结论: 在AFP特异启动子作用下,腺病毒携带的目的基因在AFP阳性的肝癌细胞中得到显著转录和表达,而在非AFP阳性细胞仅微量转录,蛋白表达极弱。该腺病毒载体可作为AFP阳性的肝癌基因靶向治疗的适宜载体。

关 键 词:甲胎蛋白类  启动区(遗传学)  腺病毒载体  HepG2细胞  
文章编号:1000-4718(2005)01-0159-04
收稿时间:2003-6-24
修稿时间:2003年6月24日

Construction of recombinant adenovirus vector expressing EGFPgene specifically in AFP producing liver cancer cells
SHI Yu-jun,LIU Chang-an,GONG Jian-ping,LI Xu-hong,PENG Yong,MEI Ying,MI Can,HUO Yan-ying.Construction of recombinant adenovirus vector expressing EGFPgene specifically in AFP producing liver cancer cells[J].Chinese Journal of Pathophysiology,2005,21(1):159-162.
Authors:SHI Yu-jun  LIU Chang-an  GONG Jian-ping  LI Xu-hong  PENG Yong  MEI Ying  MI Can  HUO Yan-ying
Institution:1Department of Hepato-biliary Surgery, The Second Affiliated Hospital of Chongqing University of Medical Sciences, Chongqing 400010, China; 2Department of Pathology, Chongqing University of Medical Sciences, Chongqing 400016, China; 3 The Institute for Radiology, The Military Academy of Medical Science, Beijing 100850, China
Abstract:
Keywords:Alpha-fetoproteins  Promoter regions(genetics)  Adenovirus vector  HepG2 cells
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