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利用反转录环介导等温扩增技术检测麻疹病毒
引用本文:李淑华,刘岩,曹广文. 利用反转录环介导等温扩增技术检测麻疹病毒[J]. 中华流行病学杂志, 2014, 35(2): 186-189
作者姓名:李淑华  刘岩  曹广文
作者单位:上海市虹口区疾病预防控制中心, 200082, 上海;第二军医大学基础部流行病教研室;第二军医大学基础部流行病教研室
基金项目:第43批中国博士后科学基金资助(20080431367);虹口区卫生局课题基金(虹卫1103-33);上海市自然科学基金(07ZR14141)
摘    要:目的 建立一种快速检测麻疹病毒的方法。方法 以分离到的麻疹病毒RNA为模板,利用环介导等温扩增技术(LAMP)原理,设计合成3套引物,特异型识别病毒基因的8个位点,在反转录酶作用下,63℃扩增60min,80 ℃2min终止反应,最终产物分别经凝胶电泳和荧光目视观察。通过real-time仪实时监测反应过程,同时将该方法的灵敏度、特异度与常规RT-PCR、real-timeRT-PCR进行比较。结果 RT-LAMP反应约1 h即可完成,最终产物经电泳观察可见大小片段不等的呈梯度的扩增条带,目视显示反应液颜色由黄色变为绿色。灵敏性是常规RT-PCR和real-timeRT-PCR的100倍。结论 RT-LAMP方法具有灵敏、特异、快速、简便、成本低等特点,适用于基层和现场使用。

关 键 词:麻疹病毒  反转录环介导等温扩增  反转录-聚合酶链反应
收稿时间:2013-11-21

Detection of measles virus genome by amplification (RT-LAMP)
Li Shuhu,Liu Yan and Cao Guangwen. Detection of measles virus genome by amplification (RT-LAMP) [J]. Chinese Journal of Epidemiology, 2014, 35(2): 186-189
Authors:Li Shuhu  Liu Yan  Cao Guangwen
Affiliation:College of Basic Medical Sciences , Second Military Medical University;College of Basic Medical Sciences , Second Military Medical University
Abstract:
Keywords:
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