经典Wnt/β-catenin信号通路介导子痫前期滋养细胞氧化应激损伤的机制研究

目的：研究经典Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路参与人滋养细胞氧化应激损伤的机制，探讨其在子痫前期（preeclampsia，PE）发病中的作用。方法：（1）采用免疫组化SP法和蛋白免疫印迹法（Western blot，WB）检测胎盘组织中β-catenin信号分子的表达。（2）将HTR8/SVneo分为正常培养对照组、缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation，H/R）处理组、氯化锂（LiCl）+H/R处理组、LiCl+正常培养组。利用WB法和间接免疫荧光法检测β-catenin在各组细胞中的表达。（3）利用流式细胞仪检测各组细胞凋亡指数及细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平。（4）利用Transwell小室模型和明胶酶谱法分析检测各组HTR8/SVneo的侵袭率及基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）-2、9的活性。结果：（1）与正常晚孕比较，子痫前期胎盘组织中β-catenin蛋白表达降低（P<0.05）。（2）与正常培养组相比较，H/R处理组的β-catenin蛋白水平显著下降，经LiCl预处理后H/R细胞中的β-catenin蛋白表达增加（P<0.01）。（3）与正常对照组相比，H/R处理可导致HTR8/SVneo凋亡率及ROS水平增加（P<0.01）；予以LiCl预处理可有效抑制H/R导致的细胞凋亡及ROS聚集（P<0.05，P<0.01）。（4）H/R组细胞的体外侵袭能力及MMP-2、9的活性均低于正常培养组；经LiCl预处理后，H/R组细胞的体外侵袭能力及清液中MMP-2、9的活性显著上升（P<0.01）。结论：LiCl通过特异性激活Wnt/β-catenin信号通路，对滋养细胞氧化应激损伤有保护性作用。