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手足口病病毒分离方法研究
引用本文:罗敏,杨洪,张海龙,冼慧霞,陈惠玲,吴微,姚相杰,何雅青.手足口病病毒分离方法研究[J].中国热带医学,2012(4):403-405.
作者姓名:罗敏  杨洪  张海龙  冼慧霞  陈惠玲  吴微  姚相杰  何雅青
作者单位:深圳市疾病预防控制中心,广东深圳518055
基金项目:广东省医学科技基金(No.B2011288)
摘    要:目的探讨影响手足口病病毒分离培养的可能因素以及方法的改进。方法取手足口病患儿的粪便、肛拭子或脑脊液、疱疹液、咽拭子,其中以粪便为主,经Hank’s平衡缓冲液(HBSS)重悬震荡后,离心取上清液接种于横纹肌肉瘤传代细胞(RD-A细胞),二次传代后通过肠道病毒致细胞病变效应(CPE)分析及EV71、CA16及肠道病毒通用试剂盒进行荧光定量PCR的方法来鉴定病毒分离效果。结果 RD-A细胞能够有效的分离EV71、CA16和其他肠道病毒,采样时间在发病3日内,病毒分离效果达到66.7%,3日以上,病毒分离效果仅有29.1%。未添加万古霉素、阿米卡星和制菌霉素的病毒分离,污染率达到75%,分离效率为13.6%,添加三种抑制细菌和霉菌的抗生素后,污染率达到3.93%,分离效率达到54.9%。结论采样时间在发病3日内,有效的抑制细菌及霉菌的生长,合理的细胞接种密度可以明显提高病毒的分离培养效率。

关 键 词:手足口病  病毒分离  细胞病变效应

Study on ioslation of viruses from patients with hand-foot-mouth disease patients
Institution:LUO Min,YANG Hong,ZHANG Hai-long,et al.(Shenzhen Municipal Center for Disease Control and Prevention,Shenzhen 518055,Guangdong,P.R.China)
Abstract:
Keywords:Hand-foot-mouth disease  Viruses isolation  Cytopathic effect
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