| pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato重组质粒构建腺相关病毒包装(英文) |
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| 引用本文： | 刁泽正,燕国清,张志伟,房晶,徐鹏,西永明,任山,刘勇君,隋爱华. pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato重组质粒构建腺相关病毒包装(英文)[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2012, 16(20): 3759-3762 |
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| 作者姓名： | 刁泽正 燕国清 张志伟 房晶 徐鹏 西永明 任山 刘勇君 隋爱华 |
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| 作者单位： | 青岛大学医学院附属医院脊柱外科,山东省青岛市,266003 |
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| 摘 要： | 背景:实验为基因治疗退变椎间盘实验的前期部分,旨在构建含免疫荧光的pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato重组质粒并应用腺相关病毒包装,为后期体内外实验打下基础。目的:构建人SOX9基因过表达腺相关病毒pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato的包装。方法:用酶切法将质粒pAAV-IRES-tdTomato和质粒pUC57-hSOX9连接成pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato,用质粒共转染方法包装腺相关病毒,感染293AAV细胞,腺相关病毒纯化及用生物学滴度测定法进行滴度测定。结果与结论:经测序结果BLAST比对分析,pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato完全与合成的基因序列hSOX9相符,滴度为1×107TU/mL。结果表明,人SOX9基因过表达腺相关病毒pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato包装成功。
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| 关 键 词： | 腺相关病毒 SOX9 转染 椎间盘细胞 病毒包装 |
pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato recombinant plasmid constructs adeno-related virus package |
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| Diao Ze-zheng , Yan Guo-qing , Zhang Zhi-wei , Fang Jing , Xu Peng , Xi Yong-ming , Ren Shan , Liu Yong-jun , Sui Ai-hua. pAAV-hSOX9-IRES-tdTomato recombinant plasmid constructs adeno-related virus package[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2012, 16(20): 3759-3762 |
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| Authors: | Diao Ze-zheng Yan Guo-qing Zhang Zhi-wei Fang Jing Xu Peng Xi Yong-ming Ren Shan Liu Yong-jun Sui Ai-hua |
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| Affiliation: | Department of Spinal Surgery,Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College,Qingdao 266003,Shandong Province,China |
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