常规RT-PCR与荧光定量RT-PCR检测GⅠ、GⅡ型诺如病毒方法的建立及其应用北大核心CSCD |
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引用本文: | 钱明明,许海燕,宗晴,阴甜甜,杨文彬,宋召军,黄金林,焦新安.常规RT-PCR与荧光定量RT-PCR检测GⅠ、GⅡ型诺如病毒方法的建立及其应用北大核心CSCD[J].中国人兽共患病杂志,2015(7):602-606. |
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作者姓名: | 钱明明 许海燕 宗晴 阴甜甜 杨文彬 宋召军 黄金林 焦新安 |
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作者单位: | 1.扬州大学人畜共患病重点实验室225009;2.南通市疾病预防控制中心226000; |
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基金项目: | 国家"863计划"(2012AA101601)~~ |
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摘 要: | 目的建立GI、GII型诺如病毒的常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测方法,并对两种方法进行应用。方法优化筛选出最佳PCR反应体系与反应条件,并从灵敏性、特异性、临床样品检测等方面对建立的方法进行比较与评价。结果该两种方法特异性强,与札幌病毒、轮状病毒、星状病毒、腺病毒同时检测无交叉反应,同一体系内GI、GII型诺如病毒相互之间没有干扰;常规RT-PCR最低检测限为103copies/μL,荧光定量RT-PCR最低检测限为102copies/μL;对180份临床粪便样品进行检测,常规RT-PCR则检测率为5.56%(10/180),符合率达97.22%,荧光定量RT-PCR检测率为8.33%(15/180),符合率达100%;对15份阳性样品测序分析,证实均为诺如病毒。结论建立的常规RT-PCR与荧光定量RT-PCR均可用于诺如病毒的快速检测,荧光定量RT-PCR更为灵敏。
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关 键 词: | 常规RT-PCR 荧光定量RT-PCR GI、GII型诺如病毒 |
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