| Ribozyme对癌基因Ki-ras~(G12V) mRNA的剪切及其特异性 |
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| 引用本文： | 吴国祥,方裕强,许国铭,李兆申,陆德如. Ribozyme对癌基因Ki-ras~(G12V) mRNA的剪切及其特异性[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志, 2000, 7(4) |
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| 作者姓名： | 吴国祥 方裕强 许国铭 李兆申 陆德如 |
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| 作者单位： | 第二军医大学长海医院消化内科，第二军医大学长海医院消化内科，第二军医大学长海医院消化内科，第二军医大学长海医院消化内科，第二军医大学分子遗传研究所 上海200433，上海200433，上海200433，上海200433 |
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| 摘 要： | 目的 :设计切割ki-rasG12V mRNA的特异性ribozyme(Rz2 17) ,明确其对癌基因ki-rasG12VmRNA的细胞内外切割活性 ,为以ki-rasG12VmRNA为特异性靶分子的基因治疗及癌基因ki-ras的功能研究提拱一种新的途径。方法 :依Symons总结的“锤头结构”原理 ,设计一种能特异性切割ki-rasG12VmRNA的ribozyme ,利用DNA重组技术构建ki-rasG12V外显子 1和ri-bozymeRz2l7的体外转录质粒及ribozymeRz2 17的真核表达质粒 ,体外转录获得ribozymeRz2 17及ki-rasG12V外显子 1mRNA ,在含Mg2 溶液中ribozymeRz2 17对其靶RNA分子进行切割。以RT -PCR对转染ribozymeRz2 17真核表达质粒的细胞ki-rasG12VmRNA进行半定量分析。结果 :ki-rasG12V外显子 1体外转录mRNA分子 ,能被ribozymeRz2 17定点切割而野生型ki-ras外显子 1体外转录mRNA则不被切割 ;转染ribozymeRz2 17的胰癌细胞ki-rasG12VmRNA含量减少 ,而转染ri bozymeRz2 17的肝癌细胞其内源性ki-rasmRNA含量无明显变化。结论 :ribozymeRz2 17无论在细胞内外均能剪切突变型ki-rasmRNA(G12V)而且其切割作用为突变型ki-rasG12VmRNA特异性的。
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| 关 键 词： | ki-ras~(G12V) mRNA 核酶 特异性定点切割 |
Cleavage of Oncogene ki-ras~(G12v) mRNA by Ribozyme and It's Specificity |
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| Wu Guoxiang,Fang Yuqiang,Xu Guoming,Li Zhaoshen,Lu Deru. Cleavage of Oncogene ki-ras~(G12v) mRNA by Ribozyme and It's Specificity[J]. Chinses Journal of Cancer Biotherapy, 2000, 7(4) |
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| Authors: | Wu Guoxiang Fang Yuqiang Xu Guoming Li Zhaoshen Lu Deru |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ki-ras G12V mRNA ribozyme cleavage |
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