| 两种荧光定量聚合酶链反应法检测乳腺癌组织中微小RNA-21的应用分析 |
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| 引用本文： | 张晟春,王燕,张兴毅,王才友.两种荧光定量聚合酶链反应法检测乳腺癌组织中微小RNA-21的应用分析[J].中国全科医学,2013,16(6):624-629. |
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| 作者姓名： | 张晟春 王燕 张兴毅 王才友 |
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| 作者单位： | 遵义医学院第五附属(珠海)医院;遵义医学院珠海校区 |
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| 基金项目： | 贵州科技厅资助项目(黔科合J字[2010]2171号);遵义医学院2009年中青年科研启动资金项目(遵医院办发[2010]1号) |
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| 摘 要： | 目的比较两种荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测乳腺癌组织中微小RNA(miR)-21的表达,选择更适用于临床的检测方法。方法选取遵义医学院附属医院普外科2010年度住院的手术治疗的乳腺癌患者,手术切除的乳腺组织标本,包括乳腺癌组织和癌旁组织(距肿瘤边缘>5 cm)14对。分别用SYBR GreenⅠ染料和Taq-Man探针作为荧光指示剂,FQ-PCR法检测乳腺癌组织和癌旁组织中miR-21的相对表达水平,应用SPSS 15.0统计软件分析两种检测模式的差异。最后用Northern Blot法进行实验验证。结果 SYBR GreenⅠ染料法检测乳腺癌组织与癌旁组织中miR-21的表达,差异有统计学意义(t=6.704,P=0.000);TaqMan探针法检测乳腺癌组织与癌旁组中miR-21的表达,差异有统计学意义(t=7.238,P=0.000)。SYBR GreenⅠ染料法与TaqMan探针法检测乳腺癌组织中miR-21的表达,差异无统计学意义(t=2.33,P=0.053);SYBR GreenⅠ染料法与TaqMan探针法检测癌旁组织中miR-21的表达,差异无统计学意义(t=0.07,P=0.95)。Northern Blot法检测乳腺癌组织和癌旁组织中miR-21的表达,探针分别为miR-21和U6的反义链,由32P标记。用Image Quant软件测定灰度值评定信号表达强弱,结果表明,乳腺癌组织中miR-21高表达,而癌旁组织中miR-21低表达。结论 SYBR GreenⅠ染料法和TaqMan探针法检测乳腺癌组织miR-21表达均较癌旁组织中明显升高,与Northern Blot法检测结果一致,但SYBR GreenⅠ染料法简单、有效、成本较低,更适用于临床miR-21的检测。
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| 关 键 词： | 乳腺肿瘤 聚合酶链反应 微小RNA-21 |
Comparison of microRNA-21 Detection Results in Breast Cancer Tissues with Two Fluorescent Quantitative PCR Methods |
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| Institution: | ZHANG Sheng-chun,WANG Yan,ZHANG Xing-yi,et al.The Fifth Affiliated Hospital of Zunyi Medical College,Zhuhai 519100,China |
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