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红细胞富集与多重RT-PCR联合检测禽流感病毒
引用本文:曾显营,耿士忠,潘志明,黄金林,张苏华,孙泉云,焦新安,刘秀梵. 红细胞富集与多重RT-PCR联合检测禽流感病毒[J]. 中国人兽共患病杂志, 2007, 23(2): 153-155
作者姓名:曾显营  耿士忠  潘志明  黄金林  张苏华  孙泉云  焦新安  刘秀梵
作者单位:扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室,扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室,扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室,扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室,上海市畜牧兽医总站,上海市畜牧兽医总站,扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室,扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室 扬州225009,扬州225009,扬州225009,扬州225009,上海201103,上海201103,扬州225009,扬州225009
基金项目:国家科技攻关计划;上海市科技兴农科技攻关项目
摘    要:目的对禽流感病毒H5、H7亚型进行更快速、更灵敏检测。方法根据禽流感病毒(AIV)核蛋白基因和血凝素基因设计3对特异性引物,建立在结合红细胞富集AIV病毒的基础上进行多重RT-PCR检测方法。结果该方法在1个反应体系中不仅能够鉴定A型流感病毒,而且可以同时确定是否为H5和H7亚型AIV;该方法的检测下限可达2.5pg的病毒RNA;对于参考毒株都可以扩增出预期大小的基因片段,而对新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的平行对照结果均呈阴性。结合AIV能够吸附鸡红细胞并在一定条件下解离的特点,利用鸡红细胞对48份已确诊样品进行病毒富集,然后用建立的多重RT-PCR方法检测富集产物结果显示48个样品中,30个为H5亚型AIV阳性,与病毒分离结果完全一致。结论由以上结果初步表明本研究建立的检测方法快速,特异,在禽流感临床筛检中显示出良好的应用前景。

关 键 词:禽流感病毒  H5、H7亚型  鸡红细胞富集  多重RT-PCR  
文章编号:1002-2694(2007)02-0153-03
收稿时间:2007-02-20
修稿时间:2006-04-04

Combination of red blood cell enrichment and multiplex RT-PCR to detect avian Influenza viruses
ZENG Xian-ying,GENG Shi-zhong,PAN Zhi-ming,HUANG Jin-lin,ZHANG Su-hua,SUN Quan-yun,JIAO Xin-an,LIU Xiu-fan. Combination of red blood cell enrichment and multiplex RT-PCR to detect avian Influenza viruses[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2007, 23(2): 153-155
Authors:ZENG Xian-ying  GENG Shi-zhong  PAN Zhi-ming  HUANG Jin-lin  ZHANG Su-hua  SUN Quan-yun  JIAO Xin-an  LIU Xiu-fan
Affiliation:1. Key Laboratory of Zoonosis of Jiangsu Provine , Yang zhou, 225009, China 2. ShanghaiAnimal Husbandry and Veterinary Station , Shanghai, 201103 , China
Abstract:
Keywords:AIV  H5 and H7 subtype  chicken red blood cell(CRBC) enrichment  multiplex RT-PCR
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