| 利用重构pc-MDR1质粒快速诱导肝癌细胞耐药 |
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| 引用本文： | 韩宇,陈孝平,蒋飞照,余正平,朱冠保,张启瑜. 利用重构pc-MDR1质粒快速诱导肝癌细胞耐药[J]. 肝胆胰外科杂志, 2004, 16(2): 93-96 |
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| 作者姓名： | 韩宇 陈孝平 蒋飞照 余正平 朱冠保 张启瑜 |
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| 作者单位： | 1. 温州医学院第一附属医院,肝胆外科,浙江,温州,325000
2. 华中科技大学同济医学院附属,同济医院,肝脏外科中心,湖北,武汉,430030 |
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| 基金项目： | 卫生部科技专项基金资助项目 (WKZ -2 0 0 0 -1-15 ) |
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| 摘 要： | 目的：从裸鼠原位耐药肿瘤组织中进行MDR1 cDNA的全克隆和pc-MDR1重组质粒的构建，并转染HepG2细胞，快速诱导其耐药，并筛选其抗性克隆。方法：设计单酶切位点引物，利甩长距离逆转录PcR(Long RT-PCR)技术，由HepG2耐药细胞扩增MDR1 cDNA，约3．8kb大小。将其插入至真核表达载体pcDNA3．0质粒中构建pc-MDR1诱导质粒，使其能够在真核细胞中表达p-gp蛋白。转染HepG2细胞，并用G418筛选出转染的细胞。结果：成功地扩增出3．8kb左右的MDR1 cDNA片段，经酶切鉴定、RT-PCR扩增特异片段和序列测序结果显示质粒构建初步成功，用G418筛选细胞耐药抗性克隆的时间约为14d。结论：从耐药肿瘤组织中进行MDR1 cDNA的全克隆和pc—MDR1诱导质粒的构建成功快速诱导了肝癌细胞发生耐药，为进一步研究肿瘤细胞的耐药机制奠定了很好的基础。
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| 关 键 词： | 多药耐药基因 基因克隆 质粒构建 转染 |
| 文章编号： | 1007-1954(2004)02-0093-04 |
| 修稿时间： | 2004-01-07 |
Drug tolerance of the hepatic cancer cells induced rapidly by reconstruction of pc-MDR1 |
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| HAN Yu ,CHEN Xiao ping,JIANG Fei zhao,et al.. Drug tolerance of the hepatic cancer cells induced rapidly by reconstruction of pc-MDR1[J]. Journal of Hepatopancreatobiliary Surgery, 2004, 16(2): 93-96 |
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| Authors: | HAN Yu CHEN Xiao ping JIANG Fei zhao et al. |
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| Affiliation: | HAN Yu *,CHEN Xiao ping,JIANG Fei zhao,et al. * the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College,Wenzhou 325000 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | MDR gene clone plasmid construction transfection |
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