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PNRC肽通过影响Ras信号途径抑制BT-474细胞的增殖
引用本文:陈彬,王越,胡晨,阳玉鹏,李渝萍,娄桂予,张艳,何凤田,周度金.PNRC肽通过影响Ras信号途径抑制BT-474细胞的增殖[J].中国癌症杂志,2009,19(3).
作者姓名:陈彬  王越  胡晨  阳玉鹏  李渝萍  娄桂予  张艳  何凤田  周度金
作者单位:1. 第三军医大学生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038
2. 第三军医大学学员旅8队,重庆,400038
基金项目:国家自然科学基金,重庆市自然科学基金 
摘    要:背景与目的:根据富含脯氨酸的核受体辅调节蛋白(proline-rich nuclear receptor coregulatory protein,PNRC)与Grb2相互作用位点资料和其他基于干扰Grb2/SH3与SOS的相互作用的富含脯氨酸短肽的设计原则,我们设计、合成了基于PNRC的抗Ras、PTD融合多肽(PTD-PARP),研究该多肽在BT474乳腺癌细胞中对Ras信号途径的影响及其抗肿瘤增殖活性.方法:用多肽合成仪合成PNRC的抗Ras PTD融合多肽PTD-PARP和其单独的PTD多肽.以PTD多肽为对照,将增加浓度的PTD-PARP与分离的、EGF刺激的BT474细胞裂解物共温育,采用免疫共沉淀结合Western blot检测Grb2免疫共沉淀复合物中SOS和PNRC的含量情况.用PTD-PARP-琼脂糖凝胶4B活化偶联磁珠免疫共沉淀BT474细胞裂解物,采用P13K,Nck和Grb2的抗体检测沉淀复合物中这些含SH3结构域的蛋白与PTD-PARP的结合能力.Western blot检测PTD-PARP对EGF刺激的BT474细胞内Ras和MAPK活化的影响.采用软琼脂克隆形成实验考察PTD-PARP对BT474细胞体外增殖的影响.结果:PTD-PARP能以剂量依赖方式抑制SOS、PNRC与Grb2的结合,它与Grb2的结合具有特异性,PTD-PARP能降低BT474细胞中EGF刺激的Ras和MAKP活化,并能显著抑制BT474细胞的体外软琼脂克隆形成.结论:PNRC抗Ras PTD融合多肽可通过影响Ras信号途径抑制乳腺癌细胞的增殖.

关 键 词:多肽  信号传导

A PNRC-derived peptidimer inhibits proliferation of BT-474 cells by interfering with Ras signaling
CHEN Bin,WANG Yue,HU Chen,YANG Yu-peng,LI Yu-ping,LOU Gui-yu,ZHANG Yan,HE Feng-tian,ZHOU Pu-jin.A PNRC-derived peptidimer inhibits proliferation of BT-474 cells by interfering with Ras signaling[J].China Oncology,2009,19(3).
Authors:CHEN Bin  WANG Yue  HU Chen  YANG Yu-peng  LI Yu-ping  LOU Gui-yu  ZHANG Yan  HE Feng-tian  ZHOU Pu-jin
Abstract:
Keywords:PNRC  PTD  Ras
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