去泛素化酶USP33对胃癌上皮细胞-间质转化的影响及对癌细胞迁移、侵袭的作用

摘 要：［目的］ 观察去泛素化酶USP33对胃癌上皮细胞-间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）及细胞迁移侵袭能力的影响，并探究其作用机制。［方法］ qRT-PCR法检测胃癌上皮细胞MGC-803、SGC-7901和人胃黏膜上皮细胞GES-1中去泛素化酶USP33的表达。MGC-803和SGC-7901细胞转染USP33-siRNA沉默USP33基因表达，qRT-PCR检测沉默效率，使用转化生长因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）信号通路抑制剂SB431542处理沉默USP33后的MGC-803和SGC-7901细胞，MTT法检测细胞增殖能力，划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell实验检测细胞侵袭能力，Western blot法检测细胞E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、TGF-β、Smad2和α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）的表达水平。［结果］ qRT-PCR检测结果显示，与GES-1细胞比较，MGC-803、SGC-7901细胞中USP33表达水平显著性降低。MTT实验、划痕实验和Transwell实验检测结果显示，USP33基因敲低后，MGC-803、SGC-7901细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著性提高。Western blot检测结果显示，沉默USP33可使MGC-803和SGC-7901细胞E-cadherin表达降低，N-cadherin、Vimentin、TGF-β、Smad2和α-SMA表达升高，而TGF-β抑制剂SB431542则逆转了这一现象，上述指标差异均有统计学意义（P＜0.05）。［结论］ USP33能够抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭及EMT转化，沉默USP33可增加其增殖、迁移和侵袭能力并促进EMT转化过程，其作用机制与抑制TGF-β信号通路的活化有关。